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近年来,随着对植物多糖研究的不断发展,人们发现很多植物多糖都具有良好的免疫调节功能。本课题组已经对锦灯笼果实水溶性多糖(PPSB)的佐剂活性进行研究,实验结果表明PPSB在白色念珠菌核酸疫苗中具有显著的免疫增强作用。然而,对于PPSB具有佐剂效应的作用机制知之甚少。研究表明,疫苗佐剂辅助抗原激发机体产生免疫反应几乎都与树突状细胞(Dendriric cells,DC)的作用有关,DC的成熟是启动特异免疫应答的一个关键步骤,而DC表达的Toll样受(Toll-Like Receptors,TLRs)是连接固有免疫和适应性免疫应答的桥梁。本论文以DC为切入点,以TLR4为靶点,对PPSB的免疫增强作用机制进行初步探讨。现将本论文主要研究结果归纳如下：1.建立了体外培养获得小鼠骨髓来源树突状细胞(Bone marrow derived dendritic cells,BMDC)的技术体系本实验采用两种方法诱导生成BMDC,并对两种方法产生的BMDC进行形态学观察和表型鉴定。结果显示,单独使用rmGM-CSF诱导培养至第8天,仅获得较低比率的BMDC,而共同使用rmGM-CSF和rmIL-4诱导培养至第5天时,可获得大量较高比率的未成熟BMDC,因此,本实验采用共同使用rmGM-CSF和rmIL-4诱导培养法,第5天获得未成熟状态的BMDC用于后续实验。2. PPSB促进BMDC表面共刺激分子CD80、CD86的表达选取上述诱导产生的BMDC进行后续实验,进一步探讨不同剂量的PPSB对BMDC表型的影响,采用流式细胞仪分别检测不同剂量的PPSB对BMDC表面共刺激分子CD80、CD86表达水平的影响。研究结果显示,与对照组相比,PPSB可以不同程度的促进CD80、CD86的表达,且在10-50ug/ml浓度范围内,呈剂量依赖关系,说明PPSB具有促进BMDC表型成熟的作用。3. PPSB能够抑制脂多糖(LPS)与BMDC的结合为研究PPSB与BMDC的特异性结合情况,本实验分别用不同浓度的PPSB和FITC-LPS竞争性结合BMDC表面的TLR4,并以未标记的LPS和FITC-LPS与BMDC结合作对照,然后用流式细胞仪检测细胞结合荧光情况。结果显示不同浓度的PPSB均能不同程度的抑制FITC-LPS与BMDC的结合,并且随着PPSB浓度的升高,FITC-LPS与BMDC结合的抑制效果依次增强,初步推测PPSB在BMDC表面的受体为TLR4。