阴道毛滴虫外泌体对生殖系统上皮细胞影响的研究

来源 :华中科技大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tzhole
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
外泌体(exosomes)是大多数类型细胞通过多泡小体与质膜融合分泌出的纳米级的膜结合囊泡,它能够通过转运各种脂质、蛋白、核酸在细胞间通信中发挥关键作用,同时具有免疫调节特性。在本研究中,探索了阴道毛滴虫(Trichomonas vaginalis,T.vaginalis)分泌的外泌体在免疫反应方面的作用,并分析了它对生殖系统肿瘤细胞增殖转移功能的影响。  目的:探索T.vaginalis外泌体介导宫颈上皮细胞和前列腺上皮细胞免疫反应,以及对宫颈癌和前列腺癌细胞增殖转移功能方面的作用。  方法:临床收集的T.vaginalis阳性标本达到体外纯培养标准后提取T.vaginalis外泌体,并通过透射电子显微镜(TEM)、纳米粒子跟踪技术(NTA)鉴定。用荧光染料PKH67标记T.vaginalis外泌体检测它被人宫颈永生化鳞状细胞Ect1、人正常前列腺上皮细胞RWPE1、人宫颈鳞状细胞癌细胞Siha、人前列腺癌细胞PC3的摄取情况。在外泌体的刺激下,用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测四种细胞培养上清中白介素6(IL6)、白介素8(IL8)的分泌,并用定量PCR技术观察细胞中几种白介素mRNA变化水平。然后运用MTT法观察外泌体的加入对Siha和PC3细胞增殖的影响。最后利用划痕愈合实验和Transwell实验检测摄入外泌体对Siha和PC3细胞迁移侵袭能力的改变,并用Western Blot观察了上皮间质转化(EMT)相关蛋白的变化。  结果:成功从临床标本中分离得到T.vaginalis并进行体外纯培养,扩大培养提取获得了T.vaginalis外泌体。用PKH67标记的T.vaginalis外泌体能够被摄取进入到Ect1、RWPE1、Siha、PC3细胞内。在外泌体的作用下,Ect1和RWPE1细胞上清中分泌的IL6、IL8均升高,但Siha和PC3未见明显变化。用外泌体刺激肿瘤细胞,对Siha和PC3细胞增殖没有明显作用,但是能够增强两种细胞迁移侵袭能力,并且这一变化是通过EMT介导的。  结论:T.vaginalis外泌体能够作用于宫颈癌上皮细胞和前列腺癌上皮细胞并引起它们的炎症免疫反应,还可以导致宫颈癌和前列腺癌转移能力增强,EMT是引起这种改变的机制之一。
其他文献
人乳头瘤病毒是一种属于乳多空病毒科的乳头瘤空泡病毒A属,是球形DNA病毒,能引起人体皮肤黏膜的鳞状上皮增殖,表现为寻常疣、生殖器疣(尖锐湿疣)等症状.随着性病中尖锐湿疣的
前言 治疗性血管新生(therapeutic angiogenesis)是通过血管生成促进因子的直接应用,特异性转基因治疗及细胞治疗以促进缺血组织血管生成,改善心肌血供为目的的治疗。缺血性