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本文主要围绕细胞色素P450酶(cytochrome P450; CYP450),从以下3个方面,深入研究白花蛇舌草注射液对异环磷酰胺的减毒作用机制：通过动物实验初步探讨白花蛇舌草注射液与异环磷酰胺合用后对肝脏CYP3A4酶活力以及肾脏氧化应激水平和组织形态的影响；白花蛇舌草中的抗肿瘤活性单体槲皮素、齐墩果酸、熊果酸分别与异环磷酰胺合用后对异环磷酰胺在大鼠体内药代动力学过程的影响；齐墩果酸和熊果酸对CYP450酶的抑制作用以及熊果酸在体外人肝微粒体中代谢酶的初步研究。实验一：雄性SD大鼠分别从尾静脉注射生理盐水、异环磷酰胺、白花蛇舌草注射液加异环磷酰胺,持续5d,测定大鼠肝脏红霉素N-脱甲基酶(CYP3A4)酶的活性,检测肾脏丙二醛和谷胱甘肽的含量变化,并且制作肾脏病理切片观察肾脏的组织形态学变化；实验二：从白花蛇舌草所含的抗肿瘤活性成分中选出了三个最有可能会影响CYP3A4酶活性的单体化合物-槲皮素、齐墩果酸和熊果酸,分别和异环磷酰胺合用,利用LC-MS/MS测定异环磷酰胺在大鼠体内不同时间点的血药浓度,采用非房室数学模型计算药代动力学参数k、tl/2、Tmax、AUC；实验三：选择常用的8种CYP亚型探针底物分别与齐墩果酸和熊果酸在人肝微粒体中共同孵育,以CYP选择性抑制剂为对照,计算两者对CYP450酶各亚型的抑制率,采用化学抑制剂和重组人CYP单酶相结合的方法,鉴定参与熊果酸代谢的CYP酶亚型。研究结果发现,异环磷酰胺对CYP3A4酶的活性有轻微的诱导作用,使肾脏的丙二醛水平升高,谷胱甘肽水平降低,并且导致了肾组织的损伤,而白花蛇舌草与异环磷酰胺合用后抑制了异环磷酰胺代谢酶CYP3A4的活性,并且使肾脏的丙二醛和谷胱甘肽的含量趋于正常水平,减轻了异环磷酰胺导致的肾脏损伤；白花蛇舌草的抗肿瘤活性成分齐墩果酸和熊果酸能够使大鼠体内异环磷酰胺的AUC降低近50%,促进其代谢转化,而槲皮素不影响异环磷酰胺在大鼠体内的药代动力学过程；齐墩果酸能够抑制CYP3A4的活性,CYP3A4和CYP2C9参与了熊果酸在人肝微粒体中的代谢。综上所述,我们可以对白花蛇舌草联合异环磷酰胺化疗后的减毒作用可能机理做如下预测：白花蛇舌草中的抗肿瘤活性成分齐墩果酸可通过抑制CYP3A4酶的活性,减少由该酶催化异环磷酰胺产生的毒性代谢产物,从而减轻化疗毒副作用。