Nucleostemin在大鼠正常和炎症生精小管中的表达及意义

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环境的变化与病原微生物的干扰将会不可避免地给机体的生殖细胞造成重要影响。据报道,男性不育症的发病率正在逐年上升。因此,对生殖细胞的研究正引起人们的重视。脂多糖的致炎作用可影响生殖细胞的正常发育,对大鼠睾丸线粒体组分具有潜在毒性,诱导氧化应激而导致睾丸生殖细胞的功能损害。Nucl-eostemin是与干细胞的增殖密切相关的重要因子,参与维持干细胞的增殖。它在细胞质内合成后转位至细胞核,然后穿梭于核质和核仁之间。GTP结合形式的Nucleostemin可锚定在核仁内,激活核仁的功能,促进细胞增殖。Nucleostemin不仅对生殖细胞的功能状态的识别极有帮助,对于生殖细胞的损伤修复机制的研究也是十分重要的。Lin28a在机体发育过程中促进多种干细胞的生长,也可通过促进代谢而增加能量供给来促进多种组织的损伤后再生。  本研究运用腹腔内注射低剂量脂多糖诱导并运用HE染色技术观察成年雄性Sprague Dawley大鼠睾丸在不同时间点时的炎症性损伤,运用免疫组织化学染色技术和免疫印迹技术检测和显示Nucleostemin和Lin28a在生理盐水处理对照组大鼠和4个时间点组—3h组、6h组、12h组和24h组—大鼠睾丸炎模型中的表达情况并运用统计软件对各组Nucleostemin阳性率、Lin28a阳性率和Nucleostemin表达量进行计算(表示为均数±标准差)、“One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test”正态性检验和对照组与各实验组的各变量的均数差异的“Independent-Samples T Test”以探明Nucleostemin和Lin28a在大鼠正常和炎症性生精小管中的表达模式,深化对生精上皮细胞的分型和功能状态的理解和初步探索生精小管炎症性损伤的可能的修复机制。  研究表明:1.腹腔内注射低剂量脂多糖导致了大鼠睾丸生精上皮的轻度损伤和次级精母细胞的第二次减数分裂的阻抑;2.Nucleostemin主要表达于正常和炎症生精上皮中的B型精原细胞、精母细胞和圆形精子细胞的核仁,Lin28a表达于正常和炎症生精上皮中的圆形精子细胞的细胞质或细胞核(以核膜处最明显),Nucleostemin和Lin28a共定位于圆形精子细胞的细胞核;与对照组相比,Nucleostemin和Lin28a在注射脂多糖后第3h、第6h和第12h时的表达水平均无显著变化(P>0.05),在第24h时的表达水平均出现了显著下降(P<0.05);3.Nucleostemin在对生精上皮细胞的类型的鉴别和对生精上皮细胞的增殖能力的判断上均有一定的参考价值;4. Nucleostemin的表达和Lin28a的表达之间可能存在一种特殊的调控机制,即:Lin28a-GTP-Nucleostemin轴。我们的发现为感染性睾丸炎导致的男性不育症的研究和治疗提供了一个新思路。
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