由禽致病性大肠杆菌(Avain pathogenic Escherichia coli, APEC)所引起的局部或者全身性感染的疾病统称为禽大肠杆菌病,其主要的临床症状有胚胎死亡、大肠杆菌性败血症、肿头综合征、脐炎卵黄囊感染、大肠杆菌性肉芽肿等,该病可以产生多种器官病变,主要病理变化有气囊病、脐炎、蜂窝织炎、腹膜炎、输卵管炎、滑膜炎、全眼球炎等一系列病症。本研究利用临床分离的O1、O78两种血清型鸡大肠杆菌分别制备了菌蜕疫苗,并接种雏鸡进行了免疫保护试验。本研究取得的结果如下：1.鸡大肠杆菌O1、O78菌蜕的制备用PCR扩增噬菌体裂解蛋白的基因E,将其连接到pMD-18T载体,测序发现有一个碱基发生了突变。进一步对突变基因进行了定点突变,经测序正确后与温控表达载体pBV220连接,构建了溶菌表达质粒pBV220-Em,并对临床分离的O1、O78两种血清型鸡大肠杆菌菌株分别进行电击转化,获得了重组大肠杆菌01-E和大肠杆菌O78-E。将两个重组菌株分别在29℃增菌培养,42℃诱导溶菌,制备了O1、O78两种血清型鸡大肠杆菌的菌蜕。结果显示溶菌灭活效率约为95%,一般在1h左右开始溶菌,2h-2.5h左右诱导结束。对于在溶菌过程中尚未灭活的大肠杆菌采用反复冻融和添加氯霉素的方法进行灭活。2.制备的菌蜕疫苗进行雏鸡免疫实验,研究交叉免疫保护率将不同浓度的鸡大肠杆菌O1、鸡大肠杆菌O78分别皮下注射8日龄的雏鸡,测得鸡大肠杆菌078的LDso为8.98×106CFU,大肠杆菌O1分离株无明显致病性。分别用制备的鸡大肠杆菌O1、O78菌蜕和甲醛灭活的鸡大肠杆菌免疫7日龄雏鸡,两周后所有免疫组皮下注射2LD50剂量的大肠杆菌O78。免疫保护实验结果显示：鸡大肠杆菌O1菌蜕的免疫保护率为80%,鸡大肠杆菌O78菌蜕的免疫保护率为70%,大肠杆菌O1、大肠杆菌O78两种甲醛灭活苗的免疫保护率分别为50%和60%。两种菌蜕免疫组比甲醛灭活组免疫效果好,其中鸡大肠杆菌O1菌蜕比鸡大肠杆菌O78菌蜕免疫保护率高,说明本实验制备的大肠杆菌O1菌蜕具有良好的交叉保护作用,雏鸡在免疫两周后抗体效价达到最高。本试验为进一步研究普遍适用的鸡大肠杆菌菌蜕疫苗提供了可靠的实验依据。