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人脑胶质瘤是颅内最常见的恶性肿瘤,近年来在治疗上虽然有所进展,但仍不满意,预后改善效果不佳,因此探索新的治疗途径尤为必要。目前基因治疗被认为是最具有应用前景的治疗手段之一,而选择合适的靶基因是基因治疗的关键。X染色体耦联锌指蛋白(zinc finger protein, X-linked, Zfx)是锌指蛋白家族中的一员,是胚胎干细胞和成体干细胞自我更新的共同分子基础。但目前国内外关于Zfx在恶性胶质瘤中的表达及功能研究尚少,因此本研究拟通过PCR技术检测Zfx在胶质瘤中的表达及通过Lentivirus介导的siRNA工具感染恶性胶质瘤细胞U251并进行功能研究。本课题从两个方面对Zfx进行研究：①通过PCR方法分别检测其在胶质瘤细胞及胶质瘤组织中的表达。②通过Lentivirus介导的siRNA工具感染恶性胶质瘤细胞U251,观察敲减Zfx基因后对U251细胞周期、增殖、凋亡的影响。第一部分ZfX在人脑胶质瘤中的表达目的检测Zfx基因在五株胶质瘤细胞株SHG44、U87、U251、A172、U373及人脑胶质瘤组织中的表达情况,为进一步研究Zfx在恶性胶质瘤细胞中的生物学功能研究奠定基础。方法采用半定量PCR方法检测SHG44、U87、U251、A172、U373等5株胶质瘤细胞株中Zfx的InRNA水平的表达；实时定量PCR方法检测35例人脑胶质瘤肿瘤标本(Ⅰ级4例,Ⅱ级13例,Ⅲ级11例,Ⅳ级7例)及5例非脑肿瘤组织标本中Zfx的mRNA水平的表达。结果半定量PCR方法从SHG44、U87、U251、A172、U373五株胶质瘤细胞株中扩增出237bp大小的目的片段,证明Zfx基因的mRNA表达于SHG44、U87、U251、A172、U373五株胶质瘤细胞株。实时定量PCR方法检测结果表明Zfx基因的mRNA在人脑胶质瘤组织中的表达均高于其在非脑肿瘤组织中的表达。结论Zfx基因高表达于人脑胶质瘤细胞及组织中,为研究Zfx在胶质瘤细胞中的生物学功能奠定了基础。第二部分ZfX在恶性胶质瘤细胞U251中的功能研究目的体外研究Zfx对恶性胶质瘤细胞U251的细胞周期、增殖、凋亡的影响,以初步阐明Zfx基因在恶性胶质瘤细胞U251中的生物学功能。方法构建lentiviral介导的干扰Zfx基因的siRNA工具,用其感染U251胶质瘤细胞株,实时定量PCR方法检测U251细胞中mRNA水平Zfx的消减效率,Cellomics法、Brdu标记法检测Zfx基因的消减对U251细胞增殖的影响,流式细胞技术检测Zfx基因的消减对U251细胞周期、细胞凋亡的影响。结果干扰U251细胞中Zfx的表达后,恶性胶质瘤细胞U251的细胞周期分布受到影响,细胞增殖减少、细胞凋亡增多。结论Zfx基因对U251细胞的细胞周期、增殖、凋亡有影响,Zfx基因有可能在恶性胶质瘤细胞的细胞周期、细胞增殖、细胞凋亡的过程中扮演着重要“角色”