延边黄牛卵母细胞体外成熟与Na+, K+-ATP酶活性的相关性研究

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为了探究延边黄牛卵母细胞Na+,K+-ATP酶的性质,以及卵母细胞体外成熟与Na+,K+-ATP酶活性的相关性,以增加对黄牛卵母细胞体外成熟过程中相关酶活性变化的基础知识,并最终利用相关知识提高延边黄体卵母细胞的体外成熟率。我们首先研究了温度和乌苯苷对延边黄牛卵母细胞Na+,K+-ATP酶活性的影响,进而分别研究了不同等级卵母细胞、不同体外培养时间的A级、E级卵母细胞、体外培养成熟的卵母细胞和体内成熟卵母细胞的Na+,K+-ATP酶活性,对延边黄牛卵母细胞Na+,K+-ATP酶活性的性质进行了初步探讨,并对延边黄牛卵母细胞的体外成熟与其Na+,K+-ATP酶活性的相关性进行了初步研究。试验结果显示,延边黄牛卵母细胞的Na+,K+-ATP酶活性在50℃是达到最大值,在反应温度低于或高于50℃是酶的活性均降低,而且在高于50℃时酶活急剧降低。乌苯苷浓度在2 mmol/L时孤雌卵母细胞完全停止卵裂。A级卵母细胞,裸卵和过成熟卵母细胞三者的Na+,K+-ATP酶活性在统计学上差异不显著。A级,E级和过成熟的卵母细胞中,E级卵母细胞的Na+,K+-ATP酶活性最高。体外培养Oh,6h,12h和24h的A级卵母细胞的Na+,K+-ATP酶活性呈上升趋势,但各组间差异不显著。而体外培养24h的E级卵母细胞的Na+,K+-ATP酶活性显著高于Oh,6h和12h组。体外培养成熟的卵母细胞的Na+,K+-ATP酶活性要显著高于体内成熟及体外培养未成熟的卵母细胞的Na+,K+-ATP酶活性。(结论)由此我们得出结论,延边黄牛卵母细胞的Na+,K+-ATP酶的最适反应温度为50℃,其活力能够被2 mmol/L乌苯苷完全抑制,不同质量的卵母细胞的Na+,K+-ATP酶活性中,裸卵的Na+,K+-ATP酶活性最高。不同等级的卵母细胞的Na+,K+-ATP酶活性不同,体外成熟过程中卵母细胞的Na+,K+-ATP活性呈上升趋势,体外成熟的卵母细胞有较高的Na+,K+-ATP活性。
其他文献
本研究应用不同的成熟培养液和冷冻方法对牛卵泡卵母细胞进行体外成熟和冷冻保存,以期筛选出较有利于卵母细胞体外成熟、体外发育的培养液和冷冻方法。以屠宰场获取的牛卵巢为