目的：由于肿瘤、炎症、外伤和发育异常等导致的骨缺损在临床上极为常见，骨缺损自身修复能力较低，只能修复有限大小的骨缺损，自体、异体骨移植作为修复骨缺损最常用的方法，存在着诸多不足：来源有限、供区结构破坏、功能受影响、具有免疫原性、传染疾病等，目前开发的骨替代材料距理想的目标还有很大距离。骨缺损的治疗一直是骨科领域不断深入研究的课题。组织工程学的发展为这一难题提供了新的思路和方法。骨组织工程学的研究内容主要包括：种子细胞、可降解的生物材料、骨生长相关因子。藻酸钙凝胶是一种理想的组织工程支架材料，藻酸钙凝胶在电镜下扫描为三维网状结构，其作为细胞载体具有以下特点：良好的力学性能、化学稳定性、低毒性、低致热源性、低免疫反应性、确定的空隙率和空隙间距、与细胞有良好的相容性并且操作可一步完成，同时，它能为细胞生长建立良好的三维空间结构，有利于氧和营养物质进行交换并排出废物，从而具有良好的骨传导作用。骨膜含有成骨细胞、骨原细胞及成纤维细胞等，大量实验证明骨膜来源的成骨细胞成骨能力强，是较好的种子细胞提供物。骨膜中及骨损伤局部分泌丰富的转化生长因子(TGF-β)和骨形态生发蛋白(BMP)，具有刺激骨膜细胞分化和骨膜成骨的作用。藻酸钙凝胶与自体骨膜细胞如何配比才能达到最佳骨骼生长状态，是实验过程中亟待解决的难题。本实验在总结前人研究经验的基础上，进一步观察自体骨膜细胞—藻酸钙凝胶复合体在动物机体中的成骨情况，并初步探讨藻酸钙凝胶与骨膜细胞的最佳配比。 方法：健康成年新西兰白兔96只，随机分成六组，即A、B、C、D、E、F组(其中A、B、C、D、E组为试验组，F组为对照组)，每组16只。手术造成双侧桡骨15mm标准骨缺损模型，将取下的双侧桡骨骨膜锐性剥离后剪成碎片，混入5ml的1640液中，用细胞悬液制备器将混合液制成细胞悬液，800转/分钟离心8分钟浓集细胞，将A、B、C、D、E组沉淀的细胞分别与藻酸钠溶液充分混匀，体积约为0.4ml(约等于骨缺损体积)，置于模型中，调节A、B、C、D、E组细胞数为总数的1、1/4、1/16、1/64、1/256，滴加葡糖酸钙使溶液变成凝胶，并植入自体右侧桡骨缺损模型处。于术后2、4、8、12周每组随机处死动物4只，将标本仔细去除肌肉后进行大体观察、X-线检查、组织学观察，同时测定血清碱性磷酸酶(ALP)、血清钙水平。 结论： 1.自体骨膜细胞悬液—藻酸钙凝胶复合体在自体内成骨作用良好，修复骨缺损效果满意，且操作简便，易于临床掌握和应用。 2.藻酸钙凝胶具有良好的组织相容性、表面活性、生物降解性和可塑形性，是一种良好的组织工程学材料，适用于构建组织工程骨。 3.骨膜细胞是骨种子细胞的可靠来源，将骨膜制成细胞悬液，成骨细胞成活率高，在合适载体中成骨作用强，并主要以软骨内成骨为主，形成多中心成骨。 4.本实验观察可以看出：家兔桡骨骨膜(面积)与澡酸钙凝胶载体(体积)比为0.862：1～3.448：1(cm2：cm3)之间时骨膜细胞悬液—藻酸钙凝胶复合体成骨作用可靠，比值过大或过小都将影响复合体成骨作用。