耐碳青霉烯类抗菌药物的阴沟肠杆菌耐药机制及耐药传播机制的研究

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目的:调查儿科临床分离的阴沟肠杆菌对临床常见抗生素的耐药现状,探究耐碳青霉烯类阴沟肠杆菌的临床分布特征,耐药机制及耐药传播机制,为临床合理用药和院感防控提供一定的实验依据。方法:回顾分析我院2009-2011年间临床感染菌种类,科室分布,标本来源和耐药现状,特别是对阴沟肠杆菌的临床现状进行详细的了解。并对2009.09~2010.12期间我院患儿感染性标本分离的阴沟肠杆菌采用VITEK全自动微生物分析仪结合鉴定卡鉴定,用药敏卡或结合K-B法做药敏试验。对分离的耐碳青霉烯类阴沟肠杆菌,采用CLSI推荐的肉汤稀释法检测最低抑菌浓度,采用改良Hodge试验检测菌株碳青霉烯酶,采用EDTA协同法检测菌株金属酶,等电聚焦电泳用于检测β-内酰胺酶,用PCR扩增耐药基因,并进行测序分型。质粒接合试验和质粒消除试验用于评估质粒的移动性。耐药基因的位置用质粒电泳进行大致的区分。结果:2009年9月~2010年12月期间,从我院临床病区获得1419株非重复分离革兰阴性菌,其中大肠埃希菌469株,占第一位(33.05%),肺炎克雷伯菌465株(32.77%)占第二位,阴沟肠杆菌100株(7.04%)占第五位。所有的革兰阴性杆菌分离自患儿的痰、尿液、脓液、分泌物、血液、咽拭子等临床标本,其中痰液的检出率最高,共1008株(71.04%,1008/1419),其次是脓液来源134株(9.44%,134/1419)等。阴沟肠杆菌主要分离自痰液(82%,82/100)。所有菌株的检出率在监护病区最高,有369株(26.00%),其次是呼吸科285株(20.08%)、新生儿科208株(14.66%);普外科160株(11.28%)等。而阴沟肠杆菌主要分离自新生儿科,占22%(22/100),其次是监护病区和呼吸科都为20%(20/100)。总体上,阴沟肠杆菌对亚胺培南、美罗培南、阿米卡星、庆大霉素、左氧氟沙星仍高度敏感(>90%),对头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦、头孢吡肟也有较高的敏感性。其中,一株耐碳青霉烯类抗菌药物的阴沟肠杆菌携带金属酶IMP-26,并且此酶由1类整合子捕获。此菌株还携带超广谱p-内酰胺酶TEM-104,它存在于一个8kb左右的可接合质粒上。结论:(1)阴沟肠杆菌对头孢类抗菌药物的耐药很严重,这与此类药物在儿科中的广泛使用引起的产β-内酰胺酶株的筛选有关。耐碳青霉烯类抗菌药物的阴沟肠杆菌也在临床被检测到。(2)金属酶IMP-26在新加坡的铜绿假单胞菌中首次被报道,国外其它地区罕有报道。在国内未曾有报道。在阴沟肠杆菌中检测到IMP-26尚属首例。(3)金属酶IMP-26是由金属酶IMP-4突变而来,金属酶IMP-4是国内流行的最主要的IMP酶,因此需加强对其突变株的管理。(4)第一次发现金属酶IMP-26存在于整合子中,有非常重要的临床意义。
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