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目的:评价 7-二氟甲氧基-5,4’-二甲氧基金雀异黄素(7-difluoromethoxy-5,4’-dimethoxygenistein,DFMG)对 Toll 样受体 4(Toll-like receptor 4,TLR4)及下游髓样分化因子 88(myeloid differentiation factor 88,MyD88)依赖性信号转导通路的影响,探讨DFMG抗血管内皮损伤的机制。方法:体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVE-12),使用LPC 10μmol/L孵育HUVE-12细胞24 h制备细胞炎性损伤模型,使用0.3、1.0、3.0μmol/L DFMG分别作用细胞炎性损伤模型6小时、12小时、24小时、48小时后收集细胞,用MTT法检测细胞增殖。用DFMG(0.3、1.0、3.0μmol/L)、金雀异黄素(genistein,GEN)、洛伐他汀、TLR4拮抗剂、TLR4拮抗剂+DFMG分别作用细胞炎性损伤模型24小时及脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)10μmol/L 孵育 HUVE-12 细胞 24 小时,收集细胞培养液上清及细胞,用ELISA法检测人肿瘤坏死因子α(Tumor Necrosis Factor-alpha,TNF-α)浓度;western blotting 检测TLR4、MyD88、TRAF-6 蛋白的表达。结果:1.MTT结果显示:10 μmol/LLPC对细胞活力有影响,可明显抑制细胞生长,与溶媒对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.005)。0.3、1.0、3.Oμmol/L的DFMG+LPC呈浓度及时间依赖性的拮抗LPC所致的细胞生长抑制,与10μmol/LLPC组相比,差异具有统计学意义(P0.005)。2.ELISA结果显示:10μmol/LLPC、LPS作用于HUVE-12与溶媒对照组、3.0μmol/LDFMG相比,细胞培养液中TNF-α的浓度明显上升,差异具有统计学意义(P<0.005)。0.3、1.0、3.0 μmol/L的DFMG+LPC呈浓度依赖性的降低TNF-α的浓度,与10 μmol/L LPC组相比,差异具有统计学意义(P<0.005);3.0μmol/LDFMG+LPC与洛伐他汀+LPC组、GEN+LPC组相比无统计学差异(P>0.005)。同时 TLR4 拮抗剂+LPC、TLR4 拮抗剂+DFMG+LPC组TNF-α的浓度是降低的,与l0μmol/LLPC组相比,差异具有统计学意义(P0.005)。3.western blotting 结果显示:10 μmol/LLPC、LPS 作用于 HUVE-12与溶媒对照组、3.0μmol/LDFMG 相比,TLR4、MyD88、TRAF-6蛋白的表达是明显增加的。0.3、1.0、3.0μmol/L的DFMG+LPC呈浓度依赖性的降低TLR4、MyD88、TRAF-6蛋白的表达;3.0μmol/L DFMG+LPC与洛伐他汀+LPC组、GEN+LPC组相比TLR4、MyD88、TRAF-6蛋白的表达相当。同时TLR4拮抗剂+LPC、TLR4 拮抗剂+DFMG+LPC 组可降低 TLR4、MyD88、TRAF-6 蛋白的表达。结论:DFMG拮抗LPC所致的内皮细胞炎症损伤可能是通过抑制TLR4-MyD88信号转导实现的。