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目的以体外培养的HaCaT细胞为靶细胞,观察葡萄籽原花青素GSPE对长波紫外线UVA照射后的HaCaT细胞AQP3、Caspase 14和BH表达的影响,探讨GSPE在紫外线引起的皮肤屏障功能破坏中的保护作用;以及GSPE对UVA照射后HaCaT细胞分泌VEGF和表达PEDF的影响,以探讨GSPE对UVA照射后血管生成因子和抑制因子的影响,揭示GSPE在光老化早期血管异常增生中的作用。探讨GSPE抵抗紫外线损害,修复皮肤屏障功能,延缓光老化的作用,并期望GSPE可以成为美白护肤品的成分选择。方法本实验选用体外培养的HaCaT细胞为研究对象,实验分三组,空白对照组,单纯光照组(UVA紫外线治疗仪照射HaCaT细胞),照光加药组(UVA照射后予不同浓度GSPE干预)。应用MTT法检测不同浓度GSPE及不同剂量UVA对HaCaT细胞增殖活性的影响。实时荧光定量RT-PCR方法测定细胞中AQP3、Caspase 14、BH 和 VEGF、PEDF mRNA 的表达。ELISA 法检测上清中 VEGF蛋白的分泌量;收集细胞,用免疫细胞化学技术测定各样本细胞中PEDF蛋白的相对表达量。结果1.GSPE浓度为5～200 μg/mL时,对HaCaT细胞增殖的影响不明显。UVA剂量为25 J/cm2时可抑制HaCaT细胞的增殖,且有统计学意义。2.UVA照射HaCaT细胞后可上调AQP3 mRNA表达,抑制Caspase 14和BH mRNA的表达。GSPE可以降低光照后上调的AQP3 mRNA、提高Caspase 14和BH mRNA的表达,且呈浓度依赖性,最终使各基因表达量接近正常水平。3.UVA照射HaCaT细胞后可上调VEGFmRNA的表达,提高VEGF蛋白分泌量;同时下调PEDFmRNA的表达,降低VEGF蛋白的含量。GSPE可降低光照后上调的VEGFmRNA的表达,抑制VEGF蛋白的分泌,并可使其接近正常水平;同时提高PEDFmRNA的表达和蛋白含量,且呈浓度依赖性。结论GSPE可调节UVA照射后的HaCaT细胞AQP3的表达,维持正常的水合作用;提高被抑制的Caspase 14和BH的表达,保证天然保湿因子的合成,从而修复UVA导致的皮肤屏障功能损伤。同时,GSPE可降低UVA照射后HaCaT细胞VEGF的表达,提高被抑制的PEDF的表达,减少UVA照射后引起的新生血管的形成。据此推测GSPE能够抵抗紫外线损害,修复皮肤屏障,抑制光老化早期血管的异常增生,延缓皮肤光老化。