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第一部分文献综述脑卒中是威胁全球老年人群生命和健康的常见疾病。卒中后抑郁（Post-stroke depression,PSD）是在卒中后出现的以抑郁症状群为主要临床特征的心境障碍,作为脑卒中的常见并发症,发生率波动在20%-40%左右,不仅严重影响脑卒中患者的生活质量,同时还增加患者死亡率和卒中复发率。从首次提出卒中后抑郁的概念到今天,研究人员一直在不懈地努力寻找特定的生物标志物和其中的机制,以更准确和及早地诊断该病。目前已知卒中后抑郁的发病与卒中部位、神经功能缺损程度、神经重塑、谷氨酸循环异常以及神经炎症等密切相关。中枢神经系统前额叶皮质、边缘系统、杏仁核以及缰核等是哺乳动物控制情感、情绪和认知的脑区。脑影像学研究也发现,抑郁症患者边缘脑区域体积减少,比如海马,该脑区神经元明显萎缩,神经元棘突以及长树突数量和密度减少,突触数目减少以及功能障碍。本课题组既往研究通过啮齿类动物也进一步证实了谷氨酸循环异常影响了海马区的突触重塑,参与了PSD的发生。近年来,更多的注意力已经集中在识别成像相关的生物标志物以及神经回路的参与,以帮助早期诊断。在本节中,我们将从病理生理学,诊断和治疗的角度回顾卒中后抑郁相关工作的现状,以及当前在寻找新的治疗选择方面的尝试。第二部分氯胺酮在卒中后抑郁模型中的抗抑郁特性:NMDAR/Ca MKⅡ途径的作用背景:PSD是脑卒中常见并发症,其发病机制及有效治疗方案仍有待进一步研究。既往研究表明N-甲基-D-天冬氨酸受体（N-methyl-D-aspartate receptor,NMDAR）拮抗剂氯胺酮具有快速、持久的抗抑郁作用,但氯胺酮对PSD的疗效及其作用机制仍有待研究。方法:线栓法阻塞大脑中动脉（Middle cerebral artery occlusion,MCAO）造成永久性局灶性脑缺血模型,复合慢性不可预见性温和应激刺激（Chronic unpredictable mild stress,CUMS）建立PSD实验大鼠模型,在左侧海马齿状回立体定向单次注射氯胺酮。糖水试验、旷野试验行为学测试评估模型建立以及氯胺酮干预后疗效。蛋白水平测定评估氯胺酮干预后NMDAR/Ca MKⅡ通路相关受体蛋白NMDAR2A、NMDAR2B、NMDAR1、NMDAR3以及下游靶点Ca MK2A、Ca MK2B基因及蛋白表达的变化。结果:PSD模型鼠在糖水试验中蔗糖消耗明显低于MCAO组大鼠（p＜0.05）,而在旷野试验中静止时间明显更长,行走距离更短,平均速度更慢（p＜0.05）。氯胺酮干预后则可PSD大鼠蔗糖消耗的显著增加（p＜0.05）,旷野实验中的静止时间缩短、行走距离以及平均速度的增加（p＜0.05）。此外,氯胺酮干预后PSD模型大鼠也在探索行为上表现出显著改善,中心区域的时间明显延长（p＜0.05）。蛋白定量分析显示氯胺酮干预后1小时PSD模型大鼠即可出现NMDAR2A表达的显著下降,该变化可持续至2小时（p＜0.05）,NMDAR2B表达则显著上调（p＜0.05）,NMDAR1和NMDAR3蛋白表达未见明显变（p＞0.05）。氯胺酮干预后1小时Ca MK2A转录及蛋白表达的显著下调（p＜0.05）,Ca MK2B转录及蛋白表达显著上调（p＜0.05）,变化均可持续2小时（p＜0.05）,均在4小时恢复至基线水平（p＞0.05）。磷酸化分析显示Ca MK2A亚基显著激活以及Ca MK2B亚基的显著失活（p＜0.05）,该变化同样起始于干预后1小时,持续至2小时（p＜0.05）。结论:氯胺酮有可能成为治疗PSD的候选药物。其快速抗抑郁作用与选择性调节海马齿状回NMDAR/Ca MKⅡ通路各亚基的活性变化相关。第三部分氯胺酮介导卒中后抑郁模型中的齿状回突触重塑:NMDAR/Ca MKⅡ通路的作用背景:突触重塑在抑郁、PSD的病理生理过程有着重要的作用。本课题组既往研究也显示海马区的突触重塑参与了PSD的发生。氯胺酮持久改善PSD模型鼠行为学症状是否与海马区的突触重塑改变有关仍有待研究。方法:MCAO叠加CUMS处理制备的PSD大鼠模型,立体定向海马齿状回单次注射氯胺酮。蛋白定量分析测定NMDAR2A、2B表达,免疫荧光染色及共聚焦技术测定NMDAR2A、2B、Ca MK2A和2B与PSD95在海马CA1、CA3和DG区域的共定位表达变化,电镜下超微结构观察海马齿状回突触可塑性改变。结果:氯胺酮干预后MCAO+CUMS大鼠的海马齿状回中NR2A/NR2B比例明显下降（p＜0.05）,效果持续4小时以上（p＜0.05）;PSD95（氯胺酮干预后1小时、2小时）、NFL（氯胺酮干预后4小时）蛋白表达快速增加（p＜0.05）,MAP2和Synaptophysin表达未见明显变化（p＞0.05）。NMDAR2A、2B、Ca MK2A和2B与PSD95在海马CA1、CA3和DG区域的共定位研究显示,氯胺酮干预后对MCAO+CUMS大鼠的NMDAR2A和Ca MK2A与PSD95的共定位没有显著影响（p＞0.05）,NMDAR2B与PSD95在海马CA1、CA3的共定位也未发生显著改变（p＞0.05）,但在DG区域NMDAR2B与PSD95共定位表达在干预后1小时显著下降（p＜0.05）,持续至4小时（p＜0.05）,而Ca MK2B与PSD95在DG区域共定位相关性在干预后1小时显著增加（p＜0.05）,持续至4小时（p＜0.05）。电镜下超微结构分析显示,氯胺酮干预24小时后MCAO+CUMS大鼠海马齿状回出现突触形态学改变,包括突触后致密区的明显延长、突触密度以及厚度显著增加（p＜0.05）,突触宽度的变窄（p＜0.05）,该变化持续至干预后7天（p＜0.05）。结论:氯胺酮的持久抗抑郁作用可能是由其诱导海马齿状回关键脑区的突触重塑所介导的,而且该过程是通过调节NMDAR/Ca MKII通路实现的,因此有快速而持久的影响。