背景和目的缺血性脑卒中(cerebral ischemic stroke,CIS)是全世界导致人类死亡和致残的主要原因之一。目前除了发病早期使用组织纤溶酶原激活剂(t PA)以及血管内血栓切除术治疗之外尚无明显有效的治疗方法。而这两种方法的治疗时间窗都非常狭窄,因此需迫切寻找改善缺血性脑卒中后患者预后的治疗方法。免疫和炎症反应参与了缺血性脑卒中的全过程,有研究统计肺炎和尿路感染等感染性并发症约占卒中患者死亡的20%。脑缺血不仅导致了血脑屏障破坏加速了脑水肿的形成,扩大脑内免疫细胞的激活,加重脑梗塞后的神经功能损伤,同时还会诱发全身性免疫抑制并增加宿主对感染的敏感性,加速卒中后感染的进程,影响患者预后。越来越多证据证明,脑卒中诱发的脑损伤可以激活神经源性途径,包括交感神经和下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴,从而导致全身免疫抑制。但卒中抑制外周血中免疫反应的分子机制仍然知之甚少。MicroRNA(miRNA)是免疫细胞中的分子开关,已有脑卒中相关研究报道了全血细胞中miRNA表达模式的改变,但是人类免疫细胞中针对大脑缺血的miRNA改变及其对免疫防御的影响尚未明确。自然杀伤(NK)细胞是细胞毒性先天淋巴细胞,对于早期宿主防御病原体至关重要,我们曾有动物实验研究发现了诱导大脑中动脉闭塞模型(middle cerebral artery occlusion,MCAO)后出现脾脏萎缩以及自然杀伤细胞数量的减少。因此,这次我们选择自然杀伤细胞,进一步研究了急性缺血性卒中后人外周血自然杀伤细胞的免疫能力,并通过miRNA测序分析了脑缺血后外周自然杀伤细胞在转录水平上出现的表达差异。方法我们从天津医科大学总医院神经内科病房募集了符合入组标准的28例缺血性脑卒中患者,其中有20例男性和8例女性,平均年龄为61.46±1.64岁。并在健康体检中心募集了年龄和性别与之相匹配的18例健康对照,其中有13例男性和5例女性,平均年龄为55.39±2.91岁。获取卒中病人及健康对照者的血标本并提取外周血单个核细胞(PBMC)后,通过流式细胞学染色评估健康对照组与卒中组自然杀伤细胞激活及功能的差异。我们还使用流式细胞分选从PBMC中分选出自然杀伤细胞,通过RT-PCR从中提取RNA后进行了miRNA测序,分析了健康对照组和卒中组自然杀伤细胞中miRNA表达水平差异。最后我们将分选出的自然杀伤细胞进行体外细胞培养,将差异表达的miRNA转染至自然杀伤细胞中,观察其对自然杀伤细胞活性及功能的影响。结果与健康对照组相比,缺血性脑卒中患者的外周血中自然杀伤细胞数量及活性明显减少,而且脑缺血所致脑损伤严重程度越大,对外周自然杀伤细胞活性的抑制程度越明显。MicroRNA测序分析表明,脑缺血可显著改变外周循环血自然杀伤细胞中miRNA的表达谱,其中miRNA451a和miRNA122出现了显著上调。我们发现抑制miR451a或miR122可以增强急性缺血性卒中后人外周血自然杀伤细胞中与激活相关受体的表达。结论脑缺血可显著改变人外周血自然杀伤细胞中miRNA的表达谱,而对miR451a或miR122的抑制可增强自然杀伤细胞中激活相关受体的表达。