Treg/Th17细胞平衡失调与原发性食道癌临床分期的相关性研究

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目的:分析Thl7和Treg细胞在原发性食道癌(primary esophagus carcinoma, PEC)患者外周血中的比例,探讨Th17和Treg细胞与原发性食道癌临床分期的相关性,为食道癌的早期诊断及以此为靶点的免疫疗法的研究提供实验依据。万法:分别收集87例原发性食道癌患者和39例健康体检者的外周血标本,常规分离单个核细胞(PBMC),流式细胞术检测Th17和Treg细胞的比例;实时定量PCR (real-time PCR)法检测外周血中Th17和Treg细胞增殖分化相关因子,IL-1R、IL-6、IL-17、IL-21、IL-22、IL-23、TGF-6、RORc、Foxp3的mRNA表达水平;应用SPSS16.0统计软件进行多元线性回归分析,探讨Thl7和Treg细胞比例与原发性食道癌临床分期及其他临床指标(年龄、性别、肿瘤部位、分化程度、浸润深度、是否出现远处转移等)之间的相关性。结果:1.流式细胞术分析结果表明,原发性食道癌患者外周血标本中Th17细胞数量显著高于正常对照组(4.598±0.776%vs3.017±0.613%,P<0.001),并与患者的临床分期(P=0.018)、淋巴结转移(P=0.026)有关,而与患者的性别、年龄、肿瘤分化程度、肿瘤大小、浸润深度等无关(P>0.05);Treg细胞数量也显著高于正常对照组(8.912±1.772%vs4.732±0.884%,P<0.001),与患者的临床分期(P=0.037)、肿瘤分化程度(P=0.029)有关,与患者的性别、年龄、肿瘤大小、浸润深度、淋巴结转移无关(P>0.05);Treg/Th17比值明显高于正常对照组(1.885±0.417vs1.568±0.338,P<0.001),并与患者淋巴结转移有关(P=0.032)。2. Real-time PCR结果提示,原发性食道癌患者Thl7和Treg细胞分化增殖相关因子,IL-1R、IL-6、IL-17、IL-21、IL-22、IL-23、TGF-β、RORc和Foxp3的mRNA表达水平均高于健康对照组,组间差异具有统计学意义(P<0.05)。3.多元线性回归分析发现,原发性食道癌患者外周血中Th17、Treg细胞数量与TNM分期密切相关(t=3.794, P=0.018; t=2.961, P=0.037)。Th17细胞、Treg细胞数量及Treg/Th17比值,随TNM分期而增加(Th17细胞:I期3.867±0.649%,Ⅱ期4.016±0.711%,Ⅲ期4.567±0.94%,Ⅳ期5.02±0.897%;Treg细胞:Ⅰ期6.577±1.283%,Ⅱ期7.934±1.352%,Ⅲ期9.725±1.190%,Ⅳ期9.97±1.274%;Treg/Th17Ⅰ期1.750±0.275,Ⅱ期1.845±0.306,Ⅲ期1.901±0.293,Ⅳ期1.984±0.435)。将Ⅰ期和Ⅱ期作为肿瘤早期阶段,Ⅲ期和Ⅳ期作为肿瘤进展期即晚期阶段,早晚期Th17和Treg细胞数量及Treg/Th17比值与正常对照组相比,均有显著差异(P<0.001);早期Th17和Treg细胞数量显著低于晚期(Th17:早期3.996±0.683%vs晚期4.887±0.793%,P<0.01;Treg:早期7.395±1.390%vs晚期9.896±1.276%,P<0.01),而Treg/Th17比值在早、晚期之间无统计学差异(早期1.820±0.298,vs晚期1.926±0.356,P>0.05)。Th17与Treg细胞随TNM分期呈正向直线关系(r=0.5832,P<0.01)。结论:1.原发性食道癌患者外周血中,Th17细胞、Treg细胞、Treg/Th17比值及增殖分化相关因子均较正常对照组显著增高。2.Th17和Treg细胞比例及Treg/Th17比值与原发性食道癌TNM分期密切相关,二者随TNM分期呈显著正向相关。3.Th17细胞和Treg细胞可促进原发性食道癌的发生发展,可作为食道癌的早期诊断及免疫抑制疗法研究的作用靶点。
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