黄河流域节节麦5~t+10.5~t亚基导入小麦后的品质效应分析

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节节麦(Aegilops tauschii Coss.,2n=2x=14,DD)被公认为是普通六倍体小麦D基因组祖先的供体种,因其含有抗病虫、抗逆等优质基因和丰富的HMW-GS类型被认为是小麦品种改良可利用的遗传资源。随着人们生活水平的提高,小麦的品质改良是近年来小麦育种的主要目标之一。本研究利用含有5t+10.5t的节节麦T093、T015与周麦18杂交、回交构建的代换系为实验材料,通过HMW-GS组成分析,筛选出含有5t+10.5t的亚基品系,随后利用SSR标记分析、HMW-GS克隆和品质测定,对5t+10.5t亚基导入小麦后的遗传效应进行分析,以期为节节麦在小麦种质资源的创新和品质改良的应用提供理论依据。具体结果如下:(1)利用SDS-PAGE技术对251份BC3F8-T093-周18和301份BC1F8-T015-周18的HMW-GS组成分析,发现在BC3F8-T093-周18群体中,只有后代品系18108的2+12亚基被5t+10.5t亚基所替换;在BC1F8-T015-周18群体中,共有40个品系的2+12亚基被5t+10.5t亚基所替换。(2)利用141对SSR分子标记对江苏、山东、河北、河南等其它地区的27份小麦与随机挑选的6个品系(18108、18458、18497、18526、18532和18668)以及亲本周麦18进行了遗传多样性分析,共检测出了26对多态性引物,聚类分析结果显示周麦18与6个代换系后代品系在同一个类群中,表明这6个后代品系是周麦18的衍生后代。(3)根据HMW-GS基因两端有高度保守性,设计引物P1和P2对后代品系18108和T093进行PCR扩增,随后利用定向缺失亚克隆的方法,获得节节麦T093和18108的Dx5t、Dy10.5t亚基基因序列,18108的基因暂命名为18108-Dx5t、18108-Dy10.5t,T093的基因暂命名为T093-Dx5t和T093-Dy10.5t。T093的T093-Dx5t和T093-Dy10.5t序列全长分别为2514 bp、1968 bp,和其后代品系18108的18108-Dx5t、18108-Dy10.5t基因序列全长相同。通过序列比对,发现这些基因具有典型的高分子量谷蛋白亚基基因的结构,此外,T093的Dx5t、Dy10.5t在后代18108中的变化非常小,仅有个别的核苷酸差异。把这些基因与普通小麦各基因组以及山羊草属D基因组上的HMW-GS基因进行系统进化树构建,发现18108的Dx5t、Dy10.5t基因均与山羊草属D基因组的HMW-GS聚在了一起,表明节节麦的Dx5t和Dy10.5t亚基基因导入了后代品系18108中。(4)为了探究节节麦亚基5t+10.5t对后代品系品质的影响,利用近红外分析仪对两个群体材料的品质参数进行了测定,发现含有5t+10.5t亚基品系的蛋白质含量、湿面筋含量、沉降值和延伸度的平均值都高于含有2+12亚基品系均值。
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