【摘 要】
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水稻黑条矮缩病毒（Rice black-streaked dwarf virus,RBSDV）是水稻黑条矮缩病和玉米粗缩病的病原物,引起寄主植物生长发育停滞、根系短少、矮化等表型。P7-2是S7的第二个ORF编码的非结构蛋白,前期研究发现该蛋白与泛素化复合体关键因子SKP1互作。为明确P7-2蛋白是否参与泛素化复合体的形成,及其与其他植物蛋白可能存在的互作关系,本论文开展了以下研究。SKP蛋白家族
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水稻黑条矮缩病毒（Rice black-streaked dwarf virus,RBSDV）是水稻黑条矮缩病和玉米粗缩病的病原物,引起寄主植物生长发育停滞、根系短少、矮化等表型。P7-2是S7的第二个ORF编码的非结构蛋白,前期研究发现该蛋白与泛素化复合体关键因子SKP1互作。为明确P7-2蛋白是否参与泛素化复合体的形成,及其与其他植物蛋白可能存在的互作关系,本论文开展了以下研究。SKP蛋白家族成员众多,为研究P7-2与不同SKP的互作关系,用同源克隆方法获得了 25个水稻SKP基因（OSKs）。酵母双杂交系统表明,P7-2可与其中8个OSK发生互作,互作强度存在差异。经Co-IP试验,进一步确认了 P7-2与其中的OSK1、OSK5和OSK20可发生互作。酵母三杂交试验结果显示P7-2-OSK1/5/20-OsCUL1三者可发生互作,预示P7-2能够与OSK-OsCUL1形成类似SCF的复合体。通过酵母双杂交和Co-IP试验发现,P7-2能够与水稻和玉米GID2互作,其与GID2互作的关键区位于P7-2的N端,OsGID2能够和OSK5和OSK20发生互作。综合以上结果,我们推测P7-2与OSKs的互作并能与CUL1形成SCF-like复合体,可能对GID2与OSKs的互作具有竞争作用,不能或者减少形成SCFGID2复合体,进而干扰了 GID2识别降解OsSLR1。鉴于GID2是赤霉素响应途径中的关键蛋白,是一个F-box蛋白,在泛素化途径中负责识别负调控因子DELLA蛋白,因此P7-2可能通过与OSK1/5/20形成SCF-like复合体,同时与GID2互作,参与了 GID2的泛素化降解过程,从而导致赤霉素响应途径受阻,导致感病植株出现矮化的症状。另外,为了对相关基因的功能做进一步的深入研究,本论文还针对相关互作蛋白在植物体内的表达情况、P7-2蛋白和SKP1的功能、以及其他植物病毒基因与OSK家族成员的互作关系开展了基础性的探索工作,获得了一些初步的研究结果。
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