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研究背景:大肠癌是国内外最常见的恶性肿瘤之一,其全球发病率呈上升趋势。临床诊断的大肠癌常已出现了淋巴结转移,大肠癌患者预后与有无淋巴结转移密切相关。目前大肠癌的总体治疗效果仍不满意,特别是对于已发生转移的大肠癌患者,其预后往往很差。大肠癌浸润转移的作用机制尚不完全清楚,国内外研究显示针对细胞增殖及转移的信号通路的分子靶向治疗有可能可以改善恶性肿瘤的预后,探索肿瘤发病机制从而找寻治疗方法一直是研究的热点。肿瘤细胞转移过程包括细胞骨架重组、细胞运动相关细胞伪足形成,细胞与细胞间及与胞外基质的粘附脱离、细胞运动迁移等过程。研究发现FAK蛋白与细胞的侵袭转移有密切的关系,FAK参与肿瘤细胞的增殖,同时FAK蛋白及其磷酸化蛋白可介导细胞运动相关蛋白的表达并诱导上皮间充质转化过程,在大肠癌发生及转移中扮演重要角色。研究表明FAK是microRNA-7的靶基因,microRNA-7通过结合于FAK mRNA3’非编码区靶向抑制FAK蛋白翻译可抑制多种肿瘤细胞的生长、侵袭、转移。因此,本实验探讨microRNA-7/FAK在大肠癌发病中的作用,为大肠癌的治疗提供新的靶点。目的:研究microRNA-7/FAK在大肠癌的表达及意义,并结合临床资料分析与大肠癌增殖转移的关系,阐明microRNA-7/FAK与大肠癌发病中的作用,为大肠癌的治疗寻找新的靶标。方法:收集大肠癌组织标本,将肿瘤组织及对应癌旁正常组织取材后分别行福尔马林固定和组织-80℃冻存,并记录病人临床病理资料。采用免疫组织化学技术检测组织中FAK、p-FAK、增殖相关蛋白ki-67蛋白表达情况,采用Real-time PCR法检测肿瘤组织及癌旁正常组织microRNA-7的表达,分析FAK、p-FAK、microRNA-7的表达与病人的临床病理资料、ki-67蛋白的相关性。结果:1. FAK蛋白、p-FAK蛋白在大肠癌组织中的表达阳性率分别是75%、65%,其表达阳性率相比对应的癌旁正常组织有明显的增高(P<0.05)。在有淋巴结转移的大肠癌中FAK蛋白、p-FAK蛋白表达阳性率也显著高于无淋巴结转移组(P<0.05)。在大肠癌组织中低分化、未分化组FAK蛋白、p-FAK蛋白表达阳性率明显高于其在中分化、高分化组表达水平(P<0.05)。在大肠癌组织中临床TNMⅢ/Ⅳ期FAK蛋白、p-FAK蛋白表达阳性率明显高于Ⅰ/Ⅱ期(P<0.05)。但FAK蛋白、p-FAK蛋白表达阳性率与患者年龄、性别、肿瘤位置无关。2. Ki-67蛋白在大肠癌组织中的表达阳性率是58.33%,显著高于相应癌旁正常组织(P<0.05)。大肠癌中Ki-67表达与FAK表达具有显著性差异,具有一定的相关性(p<0.05)。但Ki-67表达与p-FAK表达无明显相关性。3. microRNA-7在大肠癌组织中呈低表达水平。大肠癌组织中microRNA-7表达相比癌旁正常组织明显下调(P<0.05)。4.在大肠癌临床TNM Ⅲ/Ⅳ期中microRNA-7表达明显低于Ⅰ/Ⅱ期microRNA-7的表达(P<0.05)。在有淋巴结转移的大肠癌中microRNA表达水平相比无淋巴结转移大肠癌明显降低(P<0.05),但microRNA-7表达与患者的年龄、性别、肿瘤位置及肿瘤分化程度均无关。5.大肠癌中microRNA-7低表达有39例,其中FAK阳性为33例,阴性的为6例,microRNA-7高表达组有21例,其中FAK阳性为12例,阴性为9例。microRNA-7表达与FAK表达呈负相关(r=-0.303,P<0.05)。6.大肠癌组织中microRNA-7低表达组中p-FAK阳性为29例,阴性的为10例,microRNA-7高表达组中p-FAK阳性为10例,阴性为11例,microRNA-7表达与p-FAK表达呈负相关(r=-0.267,P<0.05)。但microRNA-7表达与Ki-67表达无明显相关性(P>0.05)。结论:1. FAK、p-FAK在大肠癌中表达增高。FAK、p-FAK与大肠癌的增殖、肿瘤分化程度、TNM分期、淋巴结转移相关,但与年龄、性别及肿瘤位置无关。2.大肠癌组织中microRNA-7呈低表达,microRNA-7与FAK、p-FAK表达呈负相关。microRNA-7与大肠癌的增殖、TNM分期、淋巴结转移相关,但与年龄、性别、肿瘤分化程度、肿瘤位置无关。3.microRNA-7/FAK与大肠癌发生发展相关,可能是其大肠癌发病机制之一。