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研究背景新生血管是乳腺癌的恶性标志之一,乳腺癌的增殖和转移依赖于血管新生。肿瘤细胞缺氧诱导周围血管以出芽的方式新生新的血管,提供足够的氧气与养分,满足肿瘤生长的需要,并促进肿瘤的转移。血管生成的调节是一个复杂的过程,VEGFA在其中起重要作用。抗VEGF单抗及其他小分子药物治疗方法已经应用于肿瘤的临床治疗,但是这些药物因其产生的副作用依然不能令人满意。TRPS1属于GATA转录因子家族,其编码基因突变导致鼻-指-趾综合征。许多研究报道TRPS1在乳腺及其他部位正常组织表达水平低,而乳腺癌中表达增高。TRPS1通过miR221/222调节ZEB2,从而诱导乳腺癌的上皮间叶转化。在本研究中,我们将探讨TRPS1与乳腺癌血管生成的关系以及其对VEGFA表达的影响。研究方法1选取手术切除的女性乳腺癌组织117例,免疫组化的方法检测TRPS1蛋白及CD31标记的微血管密度(MVD)的表达。2选取乳腺癌细胞系T47D及MDA-MB-231,向低表达TRPS1的乳腺癌细胞系MDA-MB-231中转染含TRPS1全长cDNA序列的载体,向高表达TRPS1的乳腺癌细胞系T47D转染含TRPS1干扰序列的病毒载体,构建T47D-TS, T47D-nc,231-TRPS1,及231-vector细胞系。3选取人脐静脉血管内皮细胞系human umbilical vein endothelial cell (HUVEC),采用HUVEC趋化作用实验检测TRPS1蛋白表达对各乳腺癌细胞系诱导HUVEC迁移能力的影响。3分别用qPCR及Western blot检测各乳腺癌细胞系中VEGFA mRNA及蛋白水平的表达,并通过ELISA方法分析各细胞系培养基上清中VEGFA蛋白浓度。4分析VEGFA基因启动子区,寻找TRPS1转录因子可能的结合位点,ChIP验证。实验结果1乳腺癌组织中TRPS1蛋白与MVD呈正相关。TRPS1阳性乳腺癌标本中75%MVD高表达,而TRPS1阴性标本中,仅有56.5%MVD高表达.TRPS1与乳腺癌MVD水平具有统计学意义(P=0.001,R=0.313)2乳腺癌细胞系中TRPS1表达促进乳腺癌细胞诱导HUVCE迁移。231-TRPS1为实验组,231-vector对照组,培养于实验组细胞上清液的HUVEC迁移能力相对对照组有显著提高(P<0.0001)。在T47D细胞中沉默TRPS1导致乳腺癌细胞诱导HUVEC迁移能力减低(P<0.01)3乳腺癌细胞系中TRPS1表达促进乳腺癌细胞表达VEGFA。231-TRPS1中VEGFA表达在mRNA(P<0.05)及蛋白水平(P<0.05)高于231-vector细胞,细胞培养基上清中VEGFA含量也增高(P<0.01)。T47D-TS中VEGFA表达在mRNA(P<0.05)及蛋白水平(P<0.01)低于T47D-nc细胞,细胞培养基上清中VEGFA含量也降低(P<0.05)。4转录因子TRPS1可以结合到VEGAF启动子区,调节其转录。结论乳腺癌中TRPS1与血管生成有关,并能促进乳腺癌细胞VEGFA的表达。通过进一步深入的研究验证,TRPS1有可能成为抑制乳腺癌血管新生的新靶点。