目的：　　通过观察不同浓度的乌骨藤粗提物（marsdenia tenacissima extract, MTE）C21甾体对肝癌细胞Bel7402、HepG2增殖、凋亡情况的影响，并从Hippo-YAP和PI3K-AKT-mTOR信号通路来研究探讨C21甾体抗肝癌作用机制。　　方法：　　采取新型四氮唑盐还原法（methyl tetrazolium salt,MTS）检测不同浓度C21甾体（0，40,80,160,320μg/ml ）对肝癌细胞Bel7402、HepG2增殖的影响；采用流式细胞术（flow cytometry,FCM）检测C21甾体对肝癌细胞Bel7402、HepG2凋亡的影响；采用Western blot检测C21甾体协调通过Hippo-YAP和PI3K-AKT-mTOR信号通路抑制肝癌细胞Bel7402、HepG2生长作用机制研究。　　结果：　　①与空白对照组相比，用一系列浓度的C21甾体处理24或48h后，Bel7402、HepG2细胞增殖明显受到抑制（P<0.05），且生长抑制率呈明显剂量依赖关系,浓度范围为20-320μg/ml；C21甾体对Bel7402细胞具有更高的细胞毒性，IC50值在24小时和48小时分别为118.8和100.6μg/ml。而在HepG2细胞中，IC50值在24小时和48小时分别为139.5和107.4μg/ml。　　②C21甾体能明显诱导Bel7402、HepG2细胞早期和晚期凋亡。用C21甾体（浓度为80和160μg/ml）处理后， Bel7402细胞中总凋亡细胞的百分比如下：24小时分别为3.25 ± 1.3％， 6.78±0.41％，48小时分别为7.06±0.63％，14.28±0.78 ％。HepG2细胞中总凋亡细胞的百分比如下：24小时分别为1.36±0.1％，3.13±0.27％，48小时分别为5.34 ± 0.57％， 8.89 ± 0.45％。　　③用C21甾体处理后，总YAP在Bel7402和HepG2细胞中表达水平显著降低，磷酸化YAP和PTEN蛋白表达显著上升（P<0.05）。与对照组相比，总的AKT和PI3K表达水平无明显变化，磷酸化AKT和PI3K呈显著下调（P<0.05）。　　结论：　　乌骨藤粗提物C21甾体在体外具有较强的抗肿瘤作用，其能够显著抑制肝癌细胞增殖并促进其凋亡。C21甾体通过上调p-YAP、PTEN及下调p-AKT、p-PI3K以及YAP的表达，从而协调通过Hippo-YAP和PI3K-AKT-mTOR信号通路抑制肿瘤生长，为临床药物的运用提供理论根据。