论文部分内容阅读
前言盆腔器官脱垂(pelvic organ prolapse,POP)是严重影响中老年妇女生活质量的一种常见病。目前POP的发病机制尚不完全清楚,目前研究表明,POP的发生与盆底支持组织中结缔组织的弹性、韧性、功能的改变密切相关。弹性纤维的缺失是结缔组织老化的基础。弹性蛋白是细胞外基质的主要组成部分之一,它以可溶性前体(即弹性蛋白原)的形式分泌至细胞外并彼此交联形成弹性纤维。Fibulin-5是一种细胞外蛋白,在弹性蛋白聚合过程中,其可作为弹性蛋白交联排列的支架从而促进弹性蛋白交联生成,从而形成弹性纤维。本课题通过检测盆底主韧带及阴道前壁中弹性蛋白和fibulin-5的表达情况,探讨弹性蛋白和fibulin-5表达异常与POP发生发展的相关性。材料与方法一、材料68例POP患者的主韧带、膨出阴道前壁组织及16例非脱垂患者的主韧带及阴道前壁组织来自2006年11月到2008年6月间中国医科大学附属盛京医院妇科手术切除的组织。所有组织均经福尔马林固定,常规石蜡包埋。二、主要试剂Fibulin-5鼠抗人单克隆抗体及弹性蛋白兔抗人多克隆抗体购自美国Santa公司,二氨基联苯胺(DAB)显色剂及S-P试剂盒购自北京中杉生物技术有限公司。三、方法免疫组织化学染色按链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶(S-P)法行免疫组织化学染色。切片常规脱蜡至水,高温高压进行抗原修复,一抗4℃孵育过夜,DAB显色,苏木素复染。用PBS代替一抗作为阴性对照。结果判定:细胞外基质内见棕黄色颗粒为阳性表达。光镜下在每张切片中随机选取10个高倍视野,评分标准:0,无阳性区域;1,阳性区域面积1-20%;2,阳性区域面积20-50%;3,阳性区域面积>50%。0-1:为Fibulin-5或弹性蛋白阴性表达;2-3:Fibulin-5或弹性蛋白阳性表达。四、统计学分析应用SPSS13.0统计分析软件,Fibulin-5蛋白与弹性蛋白表达和POP临床病理特征的关系用卡方检验,Fibulin-5蛋白与弹性蛋白表达关系用Spearman相关分析;P<0.05为有统计学意义。结果1、Fibulin-5蛋白阳性表达于细胞外基质,在POP组患者阴道前壁及子宫主韧带组织Fibulin-5阳性表达水平分别为17.24%、28.30%。而在非脱垂组阳性表达水平分别为80%、50%。二者有显著性差异(P=0.01、0.036)。统计学分析表明,伴有压力性尿失禁(P=0.036、0.016),和POP-Q分度(Ⅰ+ⅡvsⅢ+Ⅳ,P=0.035、0.020)子宫主韧带及阴道前壁组织中Fibulin-5阳性表达率明显降低。而Fibulin-5蛋白表达与患者绝经状态(P=0.236、0.185)及阴道分娩次数(P=0.510、0.562)无关。2、弹性蛋白亦表达于细胞外基质,弹性蛋白在POP组阴道壁、主韧带表达水平明显低于对照组(P=0.002、0.016),其表达水平与患者POP-Q分度密切相关(Ⅰ+ⅡvsⅢ+Ⅳ,P=0.034、0.024),而与患者是否伴有压力性尿失禁(P=0.599、0.602),阴道分娩次数(P=0.788、0.433)及患者绝经状态(P=0.695、0.707)无关。3、POP组患者子宫主韧带Fibulin-5与弹性蛋白共表达阳性率为9例,Fibulin-5与弹性蛋白均阴性率为39例。经Spearman相关性分析,Fibulin-5与弹性蛋白表达呈相关(P=0.015),在阴道前壁组织亦有统计学意义(P=0.031)。结论1、POP患者盆底结缔组织弹性蛋白和Fibulin-5蛋白表达下降,并与脱垂程度相关,与患者是否绝经及阴道分娩次数无关。2、POP患者Fibulin-5蛋白表达明显下降与伴有压力性尿失禁相关。3、弹性蛋白和Fibulin-5两者蛋白表达明显相关。