南京市江宁、溧水区中药资源普查及何首乌加工一体化与品质评价研究

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何首乌为蓼科植物何首乌(Polygonummultilflorum hunb)的干燥块根。有生首乌和制首乌之分。生首乌,具有消毒消肿、润肠通便、截疟的功能。制首乌味甘厚性温,具有补肝肾,益精血、乌须发、强筋骨的作用,国内外学者对何首乌的研究多集中在制首乌的补益作用,而对何首乌的资源状况及产地加工及其品质评价缺乏系统研究。本论文通过第四次全国中药资源普查(试点),调查江苏省南京市江宁和溧水区的中药资源状况,掌握何首乌在两区的资源分布情况,研究产地、采收时间和药材加工方法等加工因素对何首乌药材品质影响,探索科学、合理的何首乌加工一体化工艺,并通过建立指纹图谱、含量测定及药效学评价等手段,对何首乌进行品质评价研究,以期为何首乌生产、加工及质量控制提供科学依据。研究内容主要包括以下几个部分。1文献研究对大规模的中药资源普查发展历史进行研究,理清各次普查的情况;通过了解3S技术在植物资源的应用,为资源普查中其技术的应用奠定基础;通过对何首乌在全国的分布情况及其质量控制、药理作用的研究,为后期何首乌的研究提供科学依据。2江苏省江宁、溧水区中药资源普查研究2.1基于第三次全国性中药资源普查资料,从资源的种类、生态环境等方面对江宁、溧水资源状况进行梳理。从而了解江宁、溧水区的资源概况。2.2基于《全国中药资源普查技术规范》,从普查过程中样地及样方套调整、样线的设定、样方套的寻找以及组织管理等方面对普查中技术规范进行探讨。2.3根据国家普查要求及技术规范,我们取得了一定成果。本节从野生药用植物、传统知识调查、栽培药用植物及江苏省江宁、溧水两区何首乌资源状况4个方面普查成果做出展现,并分析两区的资源状况3产地、采收期、加工方法对何首乌的品质影响通过何首乌TLC定性分析,并运用spss.20.0统计软件对水分、总灰分以及其主要含有的二苯乙烯苷和大黄素、大黄素甲醚的含量测定结果进行聚类分析、主成分分析等处理,研究生长地、采收时间和加工方式对何首乌的质量影响。结果表明云南、贵州、四川的何首乌质量较优,溧水区样品两种有效成分含量均满足药典要求;9、10月份为何首乌适宜采收期;“何首乌切6mm厚片,晒干”是较为适宜的何首乌加工方法。4何首乌药材、饮片加工一体化工艺及品质形成研究4.1以二苯乙烯苷、结合蒽醌为标准,通过正交实验对何首乌药材、饮片一体化工艺进行筛选,并对结果进行加权综合评分法处理,从而优选出较优的一体化工艺。结果显示:新鲜何首乌,切6mm厚片,置于干燥箱内,50℃温度下,干燥16小时工艺较优。4.2以肠燥便秘小鼠小肠推进率、黑便排出时间以及其中的含水量为指标比较两种工艺所得何首乌饮片对小鼠排便情况的影响。药理结果表明,一体化工艺与传统工艺饮片高中低剂量组均能增加炭末在便秘小鼠小肠内的长度,与模型组比较有显著性差异(P<0.05或P<0.01),均呈现一定的剂量依赖性。一体化工艺组与传统工艺组比较未见显著性差异(P>0.05),据此推测,两种工艺所得饮片对便秘小鼠小肠推进运动作用无显著性差异;何首乌一体化产品与传统工艺产品均能有效的减少粪便在失水燥结型便秘小鼠小肠内的停留时间,其中一体化工艺(验证组)高、中、低剂量组比传统组效果更优,但无显著性差异;同时两种方法均能够提高小鼠粪便的含水量,其中一体化工艺(验证组)高剂量组提高粪便含水量的作用明显优于传统高剂量组。4.3比较何首乌两种工艺对耳肿胀小鼠的耳廓肿胀度、小鼠肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-1β、IL-6、IL-8的影响。探讨何首乌的抗炎作用。耳廓肿胀度数据显示:阳性组、一体化/传统工艺高、中、低给药组均能够显著降低耳廓肿胀度(P<0.01),且与用药剂量呈现正相关。同时两种工艺同剂量组比较,一体化工艺所得饮片抗炎效果显著优于传统工艺所得饮片(P<0.01);炎症因子数据表明:一体化工艺与传统高、中、低给药组与模型组相比有明显差异(P<0.01),其中TNF-α含量一体化高、中给药组显著低于传统高、中给药组(P<0.05),低给药组的值稍低于传统低给药组,但无显著性差异。IL-1β含量一体化高、低给药组低于传统高、低给药组(P<0.05),中剂量组低于传统低剂量组,但无显著性差异;IL-6含量一体化高、中、低剂量组均低于传统给药组,但只有低给药组有明显差异(P<0.05);IL-8结果显示,相对于传统工艺一体化工艺能够降低其含量,但只有高给药组有明显差异(P<0.01)。综合以上数据可以得出:两种工艺所得何首乌饮片均具有明显的抗炎作用,一体化工艺所得饮片抗炎作用优于传统工艺所得饮片。5何首乌饮片质量研究5.1何首乌指纹图谱研究建立何首乌的高效液相指纹图谱,通过软件处理后,确定了 18个共有峰,并通过HPLC/Q-TOF/MS对其进行定性分析;通过Matlab软件对共有峰面积进行主成分分析,结合16批何首乌中的二苯乙烯苷含量,分析指纹图谱的合理性。5.2以何首乌为载体,补充双对照TLC薄层鉴别,补充建立有害元素的限量标准,运用高效液相色谱,补充大黄酸、磷脂的含量测定,为何首乌的质量控制提供一定科学依据
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