儿茶素广泛存在于水果、蔬菜、茶叶、葡萄酒及可可制品中,具有强烈的抗氧化活性以及杀菌,抗炎症等生物学效应。儿茶素具有五种主要的单体成分:游离态的儿茶素(C)、表儿茶素(EC)、表没食子儿茶素(EGC)以及酯化的表儿茶素没食子酸酯(ECG)和表没食子酸儿茶素没食子酸酯(EGCG)。本文选取儿茶素母体成分(+)-儿茶素以及抗氧化性最强的儿茶素单体EGCG研究HepG2细胞及昆明小鼠两种实验对象研究儿茶素单体对于脂代谢的影响:(一)以HepG2细胞为实验对象检测其脂代谢产物及脂代谢基因:首先确定细胞酒精的作用浓度和时间,确定(+)-儿茶素与EGCG作用浓度。浓度确定后进行实验分组,实验结束后进行甘油三酯(TG)含量、ALT及AST活性等指标以及 SREBP-1、PPARα、CPT1 及 DGAT2 mRNA 基因检测。(1)MTT法确定酒精作用浓度100 mM、作用时间24 h;(+)-儿茶素与EGCG作用细胞浓度为300 mg/L。(2)对HepG2细胞进行甘油三酯(TG)含量、ALT及AST活性检测以及油红O染色:添加(+)-儿茶素与EGCG培养与对照组培养的细胞比TG含量、AST与ALT活性没有明显的变化,但能够有效的改善被乙醇诱导的HepG2细胞脂代谢紊乱并有效降低被酒精诱导后的HepG2细胞AST与ALT活性,油红O染色也可观察到油脂滴含量变化,结果表明与TG含量检测相一致。(3)选择SREBP-1、PPARα、CPT1及DGAT2mRNA基因进行检测发现:与空白组相比,(+)-儿茶素与EGCG作用后的细胞SREBP-1mRNA基因表达量有明显的降低,而其他的基因无明显变化;SREBP-1与CPT1 mRNA基因在细胞受到乙醇诱导后基因表达量有所升高,而PPARα与DGAT2 mRNA基因则降低;而(+)-儿茶素与EGCG作用的酒精诱导细胞SREBP-1 mRNA与CPT1 mRNA较单独酒精作用时的表达量降低,PPARα与DGAT2 mRNA表达量有所升高。(二)以昆明小鼠为实验对象,建立酒精性脂肪肝模型小鼠。模型建立成功后对小鼠进行肝脏指数记录计算、血清指标检测、肝脏H&E及油红O染色观察。正式实验将昆明小鼠分组:空白组,灌胃(+)-儿茶素与EGCG的Cat组与EGCG组小鼠,以及建立酒精性脂肪肝模型小鼠的ETOH组和建立模型成功后灌胃(+)-儿茶素与EGCG的ETOH-Cat组与ETOH-EGCG组。(1)分组确定后,检测每组小鼠血清中TG及TC含量:实验发现,与空白组小鼠相比,EGCG组小鼠血清中TG含量明显的降低;与酒精性脂肪肝模型小鼠ETOH组相比,ETOH-Cat组与ETOH-EGCG组小鼠血清中TG与TC含量明显降低。(2)实验中发现,与空白组小鼠对比,(+)-Cat组的SOD活性更高,且有明显的差异。ETOH组小鼠SOD活性低于空白组小鼠,而MDA含量则高于空白组。而ETOH-Cat组与ETOH-EGCG组小鼠的SOD活性高于ETOH组,MDA含量低于ETOH组。(3)与空白组相比,灌胃(+)-儿茶素与EGCG的小鼠血清中的AST、ALT活性无明显变化;ETOH组的ALT与AST活性均比空白组高,但是经灌胃(+)-儿茶素与EGCG后ALT与AST活性便会有所下降。(4)H&E染色可以观察到空白组小鼠的肝脏有轻微的水肿,(+)-Cat组与EGCG组的小鼠肝脏组织结构正常,空白组、Cat组与EGCG组油红O染色观察没有发现多余的油脂滴。与空白组相比,ETOH组小鼠肝脏H&E染色发现有明显的规则的圆润油脂滴,且有明显的中度水肿,说明肝脏状态变差,且结合油红O染色发现呈现油脂滴聚集,肝细胞脂肪变性。与ETOH组比较,ETOH-Cat组与ETOH-EGCG组小鼠肝脏H&E染色观察脂肪滴有明显的减少,且水肿情况也有所改善,与油红O染色结合观察发现两个组虽仍能看到红色脂滴,但与ETOH组比较发现颜色明显变浅。本文先以体外HepG2细胞实验对象,采用(+)-儿茶素与EGCG检测未经酒精诱导和经过酒精诱导后细胞内肝脂代谢指标及脂代谢基因,而后采用小鼠为实验对象,进行血清中脂代谢指标检测和肝脏形态学观察。实结果表明,在正常条件下,(+)-儿茶素与EGCG对脂代谢影响较小,在体内或体外脂代谢异常状态下作用较为明显。