干细胞是一类具有自我更新和分化潜能的细胞。利用干细胞技术,可以再造多种正常的甚至更年轻的组织器官。本实验为国家自然科学基金资助项目(30300336),主要探讨乳腺癌患者术后乳腺干细胞乳腺再生的可行性和安全性。第一部分实验对乳腺癌患者正常乳腺组织及乳腺癌组织进行原代培养,对正常乳腺细胞进行免疫磁珠分离,收集乳腺干细胞。第二部分实验通过MTT比色法和流式细胞术分析不同浓度的黄芪、丹参注射液及黄芪、丹参复合注射液对乳腺干细胞体外增殖的影响。结果证明乳腺干细胞的体外培养可以联合中药制剂以提高其增殖的能力。第三部分实验通过MTT比色法和流式细胞术分析不同浓度的吡柔比星、替加氟和紫杉醇对乳腺干细胞生长的影响。结果显示部分化疗药物对于乳腺干细胞的生长没有影响或影响较小,在进行乳腺干细胞乳腺再生同时要慎重选择化疗方案。第四部分实验将乳腺干细胞作为实验组、同源乳腺癌细胞作为对照组,应用基因芯片技术检测出差异表达基因,通过分析可以证明乳腺干细胞不具有恶性变的分子基础。本实验将中药与现代医学干细胞技术相结合,为进一步探讨中医药对干细胞生长、分化等影响提供实验依据。同时检测了目前临床常用的乳腺癌化疗药物,用以筛选出对干细胞生长没有影响或影响较小的药物,为干细胞乳腺再生应用于临床建立实验基础。应用基因芯片技术对同源乳腺干细胞和乳腺癌细胞基因组表达情况进行分析,从而验证乳腺干细胞的安全性。对研究干细胞和肿瘤干细胞的机制提供一定的启示。