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目的(1)探索原发性干燥综合征(Primary sj?gren syndrome,pSS)pSS与健康人之间肠道菌群的是否存在显著的差异性。(2)进一步探索出pSS气阴两虚型肠道菌群结构的具体差异。(3)为本课题组以后进一步研究pSS与肠道菌群相关的临床基础性研究提供相应的参考。方法收取14例符合纳入标准的女性pSS患者的粪便样本,其中7例为气阴两虚型患者、7例为非气阴两虚型患者,另外收取7例年龄为45-55岁健康女性的粪便。逐一提取所收集到的粪便样品细菌总DNA,随后进行PCR扩增,针对16SrDNA基因的V3-V4区进行illumina hiseq 2500高通量测序,得到三组的肠道菌群生物信息数据,随后结合文献智库信息挖掘进行组间OTU分析、结构多样性分析和显著性差异分析。结果(1)OTU均数比较:健康对照组(n=7)、气阴两虚型pSS(n=7)和非气阴两虚型pSS(n=7)三组间OTU的均数进行两两比较无显著性差异(P>0.05)。利用OTU Rank曲线、observed species指数、shannon指数及coverage指数等绘制稀释曲线分析三组样本的复杂度,测序结果表明:所测数据量较完整,本次测序几乎能够完整反映研究对象中所有微生物的多样性信息。(2)三组肠道菌群进行多样性比较,无明显差异。(3)菌群结构比较:健康对照组与pSS患者在菌群结构上比较,它们均主要由4个菌门组成,分别是放线菌门(Actinobacteria)、拟杆菌门(Bacteroidetes)、厚壁菌门(Firmicutes)、变形菌门(Proteobacteria)。这四种主要菌门在这三组之间两两交叉比较无显著性差异(P>0.05),但各组间的菌门含量波动范围差异明显。健康人与非气阴两虚型pSS存在显著差异的菌科是Paraprevotellaceae、疣微菌科(Ruminococcaceae)(P<0.05),健康人与非气阴两虚型pSS存在显著差异的菌属是Alistipes、Butyricimonas和Paraprevotella(P<0.05);健康人与气阴两虚型pSS存在显著差异的菌科为Mogibacteriaceae(P<0.05),健康人与气阴两虚型pSS存在显著差异的菌属是Butyricicoccus(P<0.05);健康人与pSS存在显著差异的菌种为Butyricicoccus_pullicaecorum和德氏乳酸杆(Lactobacillus_delbrueckii)(P<0.05)。(4)不同证型间pSS肠道菌群结构的差异分析:气阴两虚型pSS患者存在特异性菌门,它们分别是衣原体门(Chlamydiae)、纤维杆菌门(Fibrobacteres)、浮霉菌门(Planctomycetes)和厚壁菌门(Firmicutes),非气阴两虚型pSS患者存在的特异菌门为迷踪菌门(Elusimicrobia),但它们在组间比较无显著性差异(P>0.05);气阴两虚型和非气阴两虚型pSS患者相比Butyricicoccus属在非气阴两虚型患者中显著增加(P<0.05),而Paraprevotellaceae科则在气阴两虚型患者中显著增加(P<0.05)。结论(1)pSS患者与健康人之间的肠道菌群多样性无明显差异,但在菌群结构上表现出一些特定细菌比例的显著差异。(2)pSS患者肠道菌群结构的特征表现为:抑制炎症产生、维持免疫平衡的细菌下调为主(疣微菌科、Butyricicoccus属、Alistipes、Butyricimonas、Paraprevotella)。(3)气阴两虚型pSS患者致炎菌群丰度比非气阴两虚型pSS患者高(衣原体门和Butyricicoccus),在一定程度上说明了气阴两虚证型pSS患者是本病活动期的主要证候。