AtAAP1/AtAAP5介导氨基酸导向农药在拟南芥的吸收和输导

来源 :华南农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liuking
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氨基酸导向农药杀虫剂是以天然氨基酸作为导向基团与农药母体偶联合成的药物。本论文研究氨基酸转运蛋白At AAP1和At AAP5介导氨基酸导向农药的吸收。具体内容如下:(1)采用拟南芥野生型(Col-0)幼苗和成苗对系列氨基酸偶合物进行根部吸收输导,筛选出三个具有优良输导性的氨基酸导向农药CAP-Ala-2、Fipronil-Amide-Met-2和Fipronil-Amide-Tyr。(2)比较不同基因型At AAP1和At AAP5幼苗和成苗对药物CAP-Ala-2的吸收差异,结果发现分别过表达At AAP1和At AAP5的植株对CAP-Ala-2的吸收显著提高,但是分别敲除了At AAP1和At AAP5两个基因的植株对CAP-Ala-2的吸收量却没有显著的下降,说明氨基酸转运蛋白At AAP1和At AAP5参与介导了拟南芥根部吸收药物CAP-Ala-2的过程,但是两个基因之间功能可能有重叠。(3)比较At AAP1和At AAP5不同基因型拟南芥原生质体吸收CAP-Ala-2的吸收差异,结果发现,药物CAP-Ala-2分别在两组不同基因型拟南芥原生质体中的吸收均存在显著差异。证明氨基酸转运蛋白At AAP1和At AAP5参与介导吸收CAP-Ala-2过程。(4)药物CAP-Ala-2处理表达At AAP1和At AAP5基因的非洲爪蟾卵母细胞,并利用电压钳记录卵母细胞膜电位变化。发现药物CAP-Ala-2均未能诱导表达At AAP1和At AAP5基因的卵母细胞膜产生明显的膜电位变化。说明转运蛋白At AAP1和At AAP5不是直接介导CAP-Ala-2的转运,或者说明,电生理方法不适应于检测两个转运蛋白对药物CAP-Ala-2的转运过程。(5)利用表达At AAP1和At AAP5的非洲爪蟾卵母细胞吸收药物CAP-Ala-2,并比较其吸收差异。结果表明表达At AAP1和At AAP5基因的爪蟾卵母细胞对CAP-Ala-2的吸收量相比对照组显著提高,确认At AAP1和At AAP5能够转运药物CAP-Ala-2。本论文通过三种At AAP1和At AAP5基因型拟南芥幼苗和成苗的吸收差异、拟南芥原生质体药物吸收、爪蟾卵母细胞异源表达电压钳和爪蟾卵母细胞药物吸收等实验,证明了氨基酸转运蛋白At AAP1和At AAP5参与介导拟南芥根部吸收药物CAP-Ala-2过程。氨基酸转运蛋白At AAP1和At AAP5作为氨基酸导向农药载体的功能鉴定,为实现通过基因调控方式提高农药的生物利用度提供了可能。
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