斑马鱼病原菌的鉴定和药物敏感性分析

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斑马鱼(Danio rerio)作为一种模式动物,被广泛应用于遗传学、神经生物学、发育生物学、药物筛选和环境监测工作等科学研究领域。但是对病原菌影响斑马鱼健康状态的研究却比较少。其中由细菌引起的疾病发病率高,死亡率高,损失比较大,因此一直是研究的重点。在目前实验用鱼细菌性疾病研究还比较匮乏的情况下,我们展开了本实验的研究,不仅为实验室科研能够顺利的进行提供了质量保障,而且还对模式动物斑马鱼细菌性疾病的防治积累了科学资料,为今后实现实验用鱼的标准化检测及应用能提供一定的参考。本课题从本实验室饲养的被病原菌感染的具有典型病症的斑马鱼身上,分离出具有较强致病性的致病菌分别为2号菌、3号菌、4号菌。我们对这3种菌进行细菌的形态观察和染色、生理生化特性、16SrDNA序列分析等鉴定得出,2号菌属于拜氏不动杆菌(Acinetobacter beijerinckii),3号菌属于维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)、4号菌属于中间气单胞菌(Aeromonasmedia)。为了解这3种致病菌致病性的强弱,用不同浓度的病原菌采用浸泡的方式分别回归感染正常的斑马鱼,在处理的一周之内对斑马鱼的状态进行观察记录,并测定出拜氏不动杆菌、维氏气单胞菌和中间气单胞菌三种病原菌的半致死浓度,分别为1.0×108cfu/ml、3.3884X 105cfu/ml和3.4674×106cfu/ml,其中维氏气单胞菌病原菌对斑马鱼的毒力最强。为了消除病原菌对斑马鱼健康状态的干扰,保证实验用鱼的健康状态,我们选取了常见的杀菌药物,对这3种病原菌做了药物敏感性实验发现,这3种病原菌都对洛美沙星、左氧氟沙星、诺氟沙星都极度敏感,故在实验室集约化养殖的斑马鱼中,可以用这些药物对这些病原菌造成的疾病进行控制和预防。通过本实验的研究,我们对实验室中患病斑马鱼的细菌性感染疾病有了一定的认识,保证了本实验室中利用斑马鱼的研究实验的顺利进行,更为以后实验用鱼的质量保障提供了依据。
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