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L-鸟氨酸是精氨酸、瓜氨酸合成的中间体,对肝脏疾病的治疗具有良好的效果,其市场前景日益广阔。本文采用膜分离技术对L-鸟氨酸发酵液进行预处理,利用模拟移动床技术研究了连续、高效地分离纯化L-鸟氨酸的工艺条件,探索了L-鸟氨酸的脱色结晶工艺条件,为实现L-鸟氨酸的工业化生产奠定了基础。
通过比较各种膜的通量、除菌效果,选用截留分子量为500kD的陶瓷膜进行发酵液的预处理。通过考察各操作参数对通量的影响,确定了陶瓷膜分离的工艺条件为:pH为2.5,操作压差为0.22MPa,操作温度为60℃,浓缩比为14。
通过静态吸附实验、动态吸附及洗脱实验,选择了铵型LH-6阳离子交换树脂为合适的吸附剂,确定了L-鸟氨酸上柱浓度为30g/L,床层高径比为5.9,最适合的上柱pH为2.0,上柱流量为10mL/min,洗脱剂为0.5mol/L的氨水,洗脱剂的最佳洗脱流量为10mL/min。
通过考察模拟移动床系统中萃取液和萃余液出口L-鸟氨酸浓度的变化情况,确定了合适的操作条件为:进料液流量为25.8mL/min,水洗液流量为17.3mL/min,洗脱剂流量为26.0mL/min,清洗液流量为34.5mL/min,切换时间为2.90h。在该操作条件下,L-鸟氨酸收率大于97%,模拟移动床系统能够稳定可靠地运行,与单柱分离纯化L-鸟氨酸相比,产物收率大为提高,洗脱剂用量明显降低。
通过优化L-鸟氨酸的粗结晶条件,L-鸟氨酸粗结晶收率大于80%。通过脱色剂的选择及优化脱色条件,L-鸟氨酸脱色率大于95%。通过优化L-鸟氨酸盐酸盐的结晶条件,确定了L-鸟氨酸盐酸盐的结晶工艺条件为:脱色液浓度为450g/L,结晶温度为20℃,乙醇与水的体积比为1.1,pH为4.8,结晶时间为6h,搅拌转速为200rpm。最终得到了纯度为98.7%的L-鸟氨酸盐酸盐结晶。