【摘 要】
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目的:通过建立缺氧胰岛移植模型,探讨人羊膜提取物对胰岛活性和分泌功能的保护作用及相关分子机制的研究方法:建立小鼠原代胰岛缺氧模型,分为缺氧培养组、缺氧+人羊膜提取物处理组和正常氧气培养组,移植前体外培养12小时后,用吖啶橙(AO)和溴化乙锭(EB)染色评估胰岛的活性;用葡萄糖刺激胰岛素释放试验监测胰岛胰岛素分泌功能;探索人羊膜提取物保护胰岛的机制,Western blot法检测相关蛋白Nrf2、H
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目的:通过建立缺氧胰岛移植模型,探讨人羊膜提取物对胰岛活性和分泌功能的保护作用及相关分子机制的研究方法:建立小鼠原代胰岛缺氧模型,分为缺氧培养组、缺氧+人羊膜提取物处理组和正常氧气培养组,移植前体外培养12小时后,用吖啶橙(AO)和溴化乙锭(EB)染色评估胰岛的活性;用葡萄糖刺激胰岛素释放试验监测胰岛胰岛素分泌功能;探索人羊膜提取物保护胰岛的机制,Western blot法检测相关蛋白Nrf2、HO-1的表达情况。使用链脲佐菌素(STZ)腹腔注射诱导建立小鼠糖尿病模型,将体外培养后的胰岛进行移植,观察移植术后受体血糖、体重、糖耐量以及移植物病理情况。采用Graph-Pad Prism 6软件分析实验数据,P<0.05表示差异有统计学意义,所有实验至少进行了3次。结果:缺氧明显降低胰岛的活性和胰岛素分泌功能,而人羊膜提取物能显著提高缺氧应激下胰岛的活性和胰岛素分泌功能,差异有统计学意义(P<0.05)。相比缺氧培养组,缺氧+人羊膜提取物处理组中胰岛细胞内Nrf2/HO-1的表达水平明显提高(P<0.05),同时加入人羊膜提取物的正常氧气培养组中,胰岛细胞内Nrf2/HO-1的表达水平也有所增加。添加人羊膜提取物(hAME)培养缺氧胰岛并移植对糖尿病小鼠异常血糖具有更好的调控作用,同时增加受体的体重,改善受体的糖耐量,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:人羊膜提取物能显著改善小鼠胰岛在缺氧条件下的活性以及葡萄糖刺激胰岛胰岛素分泌功能,上调胰岛细胞内Nrf2/HO-1的表达水平来抵抗缺氧造成的氧化应激并提高胰岛移植的效果。
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