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食用植物油质量安全问题不仅影响油料相关产业发展,更威胁消费者生命安全和消费权益。食品加工和日常烹饪中食用植物油的消费量不断增加,使得大量食用油通过餐厨废弃油脂的形式流出。据统计,全球每年大概有1000万吨的餐厨废弃油脂产生。正常情况下,这些餐厨废弃油脂可被作为生物能源加以开发利用。然而,由于食用植物油种类繁多,价格差异较大,一些不法之徒受利益驱使将餐厨废弃油脂回收后进行非法加工,使其再次流向餐桌。食用植物油在经过煎炸、水煮等烹饪过程后,其营养价值大大降低,过氧化值高,反式脂肪酸增多等,还会因为混有食物残渣及动物组织等而引起细菌真菌等污染,导致毒素的产生,例如黄曲霉毒素,作为强致癌物在精炼过程中难以被除去,严重威胁消费者饮食健康。通过对文献报道的食用植物油和市场餐厨回收油中辣椒素类物质含量的数据汇总及分析,发现辣椒素类物质可以作为餐厨回收油的外来标志物。针对食用植物油缺乏快速鉴别技术难题,研究建立了餐厨回收油外来标志物辣椒素的免疫亲和-超高效液相色谱-多级质谱联用检测技术（IAC-HPLC-MS/MS）和现场免疫快速鉴别技术,最后再研究建立了食用植物油外源污染物辣椒素类物质和黄曲霉毒素同步快速检测技术,为保障食用植物油质量安全提供了关键技术支撑。本研究主要内容及创新点如下:1.研究了辣椒素类物质半抗原分子设计异源学规律,探明了辣椒素类物质抗原最佳分子结构,成功研制出辣椒素类物质高亲和力单克隆抗体首次设计合成出辣椒素类物质4种人工半抗原hapten X、hapten A、hapten B和hapten C,将其与蛋白偶联后得到人工完全抗原,分别免疫日本大耳白兔得到4种抗血清,通过酶联免疫吸附实验验证不同的抗原结构对免疫效果及免疫分析的影响。利用所合成的免疫效果较好的免疫抗原免疫Balb/c小鼠,选择效价与灵敏度均较高的小鼠进行冲击免疫用于细胞融合,最后筛选得到1株长势稳定、亲和力强、灵敏度高的细胞株YQQD8,对辣椒素、二氢辣椒素以及合成辣椒素的IC50值分别为8.5、5.0、13.5 ng/mL,说明该细胞株抗体可以用作辣椒素类物质的通用单克隆抗体。2.研究建立了食用植物油辣椒素ELISA批量样品快速检测技术利用辣椒素类物质单克隆抗体YQQD8及检测抗原OVA-hapten C建立了餐厨废弃油脂中辣椒素类物质ELISA检测方法。辣椒素类物物空白标准曲线、稀释基质标准曲线和浓缩基质标准曲线的IC50值依次为5.93 ng/mL、6.64 ng/mL和8.36 ng/mL。该方法能适用于批量食用植物油样品快速分析。3.研究建立了食用植物油辣椒素荧光偏振免疫分析技术设计合成出4种辣椒素类物质荧光标记抗原,选最佳抗原CPC-3-EDF（Rf=0.9）与YQQD8建立辣椒素类物质荧光偏振免疫分析技术（FPIA）,该方法的线性范围(IC20IC80)为0.01260.1009μg/mL。与ELISA方法相比,FPIA受基质效应影响,导致检测灵敏度略低,但荧光偏振检测技术操作更加简便,加完样品后即可读取检测结果,避免了人为操作影响。4.研究建立了食用植物油辣椒素类物质胶体金免疫层析分析技术通过将基于辣椒素类物质抗体YQQD8的免疫检测技术与层析技术相结合,研究建立了辣椒素类物质胶体金免疫层析分析方法,该方法对辣椒素类物质的裸眼可视检测限为2.00 ng/mL,T线消线浓度为32.00 ng/mL。根据实际样品前处理浓缩,该方法对油脂样品中辣椒素类物质的裸眼可视检测限为0.40μg/kg,检测线T线消线浓度为6.5μg/kg。胶体金免疫层析法不仅检测结果裸眼可视,且受油脂样品基质影响较小,大大提高检测灵敏度,可适用于食用植物油样品快速筛查甄别。5.研究建立了辣椒素类物质时间分辨荧光免疫层析方法（TRFICA）通过将基于辣椒素类物质抗体YQQD8的荧光免疫检测技术与层析技术相结合,研究建立了辣椒素类物质时间分辨荧光免疫层析分析方法（TRFICA）,该方法对检测辣椒素类物质的线性范围为1.9562.5 ng/mL。针对油脂样品提取液浓缩,TRFICA对油脂样品中辣椒素类物质的最低线性检测范围是0.3912.5μg/kg。所建立的TRFICA可以用于油脂样品中辣椒素类物质的定量检测中,也可以根据辣椒素类物质的含量初步判定所检的样品是餐厨废弃油脂样品还是疑似花生油样品。6.研究建立了辣椒素及二氢辣椒素IAC-HPLC-MS/MS确证性检测方法利用对有机溶剂耐受较好的辣椒素类物质特异性抗体研制免疫亲和柱,并将其与高效液相色谱-串联质谱技术相结合,建立了辣椒素及二氢辣椒素检测方法IAC-HPLC-MS/MS。该方法对辣椒素及二氢辣椒素的最低检出限为0.02和0.03μg/kg,定量限为0.08和0.10μg/kg,可以用于检测油脂中辣椒素类物质含量,从而鉴别餐厨废弃油脂,保障食用植物油质量安全。7.研究建立了食用植物油辣椒素和黄曲霉毒素胶体金免疫层析同步分析技术利用YQQD8与黄曲霉毒素通用抗体1C11首次研制出能够同步检测该两种分析物的胶体金免疫层析试纸条,对辣椒素类物质及黄曲霉毒素总量的裸眼可视检测限分别为2.00、0.10 ng/mL。将该方法应用于检测辣椒素类物质及黄曲霉毒素总量判别餐厨废弃油脂效果较好。该方法操作简便、成本低廉、不需要大型仪器设备以及专业操作人员等,为相关部门对食用植物油质量安全的监管提供重要技术支撑。