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瘤胃是反刍动物利用纤维物质的重要场所,瘤胃微生态系统作为生物界最复杂、最有应用价值的生态系统之一,一直是营养学和微生物学深入研究的对象。国内外研究结果表明瘤胃厌氧真菌对纤维物质降解、瘤胃内环境稳态发挥了重要的作用,与反刍动物生产效率紧密相关,因此筛选高效瘤胃厌氧真菌并研究其对纤维物质的降解及瘤胃内环境的影响具有重要的理论和实践意义。本论文利用体外法分三个试验进行研究。试验一采用亨盖特滚管法,以饲料干物质降解率为指标对瘤胃厌氧真菌进行纯化、筛选与富集培养。然后采用双因素完全随机试验设计,设4个菌株（A、B、C、D）和两种底物稻草（G）、玉米秸秆（J）,共8个处理,每个处理3个重复,培养时间48 h,测定DM降解率。试验结果从荷斯坦奶牛瘤胃液中分离纯化出4株厌氧真菌A、B、C、D;底物为G时,C菌降解率最高,显著高于B菌（P<0.05）,但与A菌、D菌差异不显著（P>0.05）;底物为J时,C菌D菌的干物质降解率显著高于A菌和B菌（P<0.05）,但C菌与D菌,A菌与B菌无显著性差异（P>0.05）。综合以上结果,选择C菌和D菌进行后续试验。C菌和D菌利用28S r RNA基因序列进行分析比对,确定两株菌分别为Phialemoniopsis sp.和Cladosporium sp.（后简称为P菌和C菌）。试验二在试验一的基础上,利用筛选出的两株厌氧真菌,设6个接种剂量,选择全株玉米青贮（Q）、玉米秸杆（J）、苜蓿（M）和羊草（Y）4种粗饲料两两组合进行体外培养,以期得到使不同饲料DM和NDF降解率达到最大的接种剂量。接种剂量为0%、1%、3%、4%、5%、7%,培养时间48 h,共96个处理,测定DM、NDF降解率。研究结果表明,添加不同剂量的P菌对NDF的降解率除NQ组外,其余各组各剂量间的降解率差异均不显著（P>0.05）,NQ组4%剂量组显著高于3%组（P<0.05）;而对DM的降解率不同组间剂量和饲料来源影响差异显著（P<0.05）,综合试验结果表明,添加P菌抑制了秸秆和羊草的降解,而促进了青贮和苜蓿的降解,后期选择青贮和苜蓿进行试验,青贮剂量选择1%,苜蓿选择3%。添加不同剂量的C菌对NDF降解率除NM组5%剂量组显著高于7%组（P<0.05）以外,其它组间差异均不显著（P>0.05）,说明对NDF的降解率不随剂量的增加而增加。添加不同剂量C菌对DM降解率影响差异显著（P<0.05）,DQ组1%、3%剂量组显著高于其他组（P<0.05）,DJ组7%剂量组显著高于3%和4%组（P<0.05）,DY组1%剂量组显著高于7%组（P<0.05）,综合分析结果可知,添加C菌后对不同饲料DM的降解率影响不同,DQ组显著高于DM组,极显著高于DJ和DY组,因此后续也选择青贮和苜蓿继续研究,剂量均选择1%。试验三研究最佳接种剂量下外源厌氧真菌对瘤胃发酵参数的影响。采用双因素完全随机试验设计,根据试验二的结果将不同饲料和菌株作为影响因素,得到4个组合,青贮P菌（QP）、苜蓿P菌（MP）、青贮C菌（QC）、苜蓿C菌（MC）,每个组设三个处理,分别为试验组（QP、MP、QC、MC）、阳性对照组和阴性对照组,每组每个处理3个重复,培养时间为0 h、1 h、2 h、6 h、12 h、24 h和48 h 7个时间点,监测p H、NH3-N浓度、BCP浓度和VFA浓度。研究结果表明,对于p H值,QP、QC组三个处理差异显著（P<0.05）,阳性对照组显著高于阴性对照组（P<0.05）,极显著高于试验组（P<0.01）,阴性对照组显著高于试验组（P<0.05）,MP、MC组三个处理间差异不显著（P>0.05）。对于NH3-N浓度,4个组合除QP外,各处理组差异均不显著（P>0.05）,QP组阳性对照组显著高于其它两组（P<0.05）,而后二者差异不显著(P>0.05。对于BCP浓度,以全株玉米青贮为底物,P菌和C菌均为试验组显著高于其它两组（P<0.05）;以苜蓿为底物P菌试验组显著高于阳性对照组（P<0.05）,与阴性对照组差异不显著,而C菌则为阴性对照组浓度最高,显著高于其他两组（P<0.05）。说明P菌可以显著提高BCP浓度,而C菌则因不同底物受到影响。对于VFA浓度,QP、QC组乙酸浓度各个处理均无显著差异（P>0.05）,MP组阴性对照组显著高于阳性对照组和试验组（P<0.05）,MC组阴性对照组显著高于试验组（P<0.05）,阳性对照组与二者相比差异不显著（P>0.05）。QP、MP、MC组各处理丙酸浓度无显著差异（P>0.05）,QC组试验组显著低于阴性和阳性对照组（P<0.05）;QP、QC、MP、MC组各处理丁酸浓度、TVFA浓度和乙丙比均无显著差异（P>0.05）。对于时间的影响,各组合各指标均差异显著（P<0.05）,说明时间影响显著。综上所述,在本试验条件下,从奶牛瘤胃液中提纯的P菌和C菌对粗饲料的DM降解率因底物不同而不同,可以促进全株玉米青贮和苜蓿的DM降解率;在适宜底物条件下P菌的最佳接种剂量青贮为1%,苜蓿为3%,C菌的接种剂量两种饲料均为1%,综合瘤胃内环境指标的结果可以得出P菌影响较大,C菌影响较小,可显著提高BCP浓度,有望开发出提高纤维物质降解的添加剂服务于反刍动物生产。