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大麦是世界上重要的禾谷类作物,种植面积广,在我国也有悠久的栽种历史,其主要用作牲畜饲料、食品加工原料以及酿造啤酒等。大麦黄花叶病是土传病毒,病毒寄生于土壤中禾谷多黏菌的孢子中,具有发病范围广,传播速度快,感染率高的特点,对冬大麦品种造成产量损失甚至达到半数以上。转录因子在植物抵抗外界胁迫中起着重要的作用。本课题对大麦中的NAC转录因子进行研究,寻找与大麦黄花叶病相关的NAC基因,并对其功能进行研究。本实验研究对象采用大麦黄花叶病易感品种Morex,Igri以及Barke,通过转录组测序鉴定感染大麦黄花叶病致病相关基因的调控网络;通过通路克隆的技术得到与大麦黄花叶病相关的两个NAC转录因子,对其进行生物信息学分析预测该基因的表达特征和与其他物种的进化关系;构建载体后进行由农杆菌介导的亚细胞定位;采用酵母双杂技术研究转录因子互作的蛋白。了解大麦感染BaMMV中两个NAC转录因子HvNAC6(HORVU5Hr1G011650)和HvNAC7(HORVU7Hr1G106480)的作用,为后期培育抗大麦黄花叶病品种提供基础。1.参考依据RNA-seq分析的结果,在本转录本共37,804个基因中,在用大麦黄花叶病感染Igri幼苗前后,有效差异表达的基因数为10,164个,其中上调表达的基因数为5,192个,下调表达的基因数为4,972个。其中预测得到了534个转录因子,分属与多个不同的转录因子家族。2.大麦感染BaMMV前后进行RNA-seq分析后,HvNAC6和HvNAC7有明显表达的上调。通过组织表达分析发现,HvNAC6多在结实后期以及外颖壳中都有显著表达,但是在幼嫩的新生穗中没有表达,新生穗中有微弱的表达。HvNAC7在苗根中有显著的表达。由保守结构域分析,两个NAC转录因子都具有NAC家族保守结构域。3.由农杆菌GV3101介导感染烟草对HvNAC6和HvNAC7进行亚细胞定位,结果显示两者都是核定位蛋白,在细胞核中的行使相应的功能。4.转录因子在酵母系统中与BaMMV病毒蛋白构建、易感因子eIF4E、隐性抗病基因PDIL5-1进行酵母双杂交,结果没发现有蛋白互作。这表明其并没有直接作用于感染BaMMV的过程中,可能多作为一个调控或者是修饰的转录因子的存在于这个过程中。5.通过qRT-pcr技术分析HvNAC6和HvNAC7在在抗感材料中的表达差异。只发现HvNAC7在24份大麦黄花叶病感病材料中的表达水平显著高于24份抗病材料中表达水平,表明HvNAC7与大麦黄花叶病感染的响应调控有着重要的关系。