目的：　　探讨呼吸道合胞病毒（respiratory syncytialvirus，RSV）感染人肺泡Ⅱ型上皮细胞（A549）后，Toll样受体（Toll-like receptor,TLR）3、7的水平变化，初步研究TLR3和TLR7活化后在RSV感染中介导产生的I型干扰素（interferon，IFN）抗病毒作用及其可能的调控机制，为临床预防与治疗RSV的感染提供新的思路。　　方法：　　以RSV感染A549细胞后，分为正常对照组、RSV感染组、TLR3小干扰RNA（TLR3siRNA）沉默组、TLR7小干扰RNA（TLR7siRNA）沉默组。分别于感染的4h、8h、12h和24 h后收集各组细胞以及上清液，以未感染病毒的细胞组为正常对照组。　　（1）用Trizol试剂提取细胞总RNA，半定量RT-PCR法检测各组TLR3、TLR7、干扰素调节因子3（Interferon regulatory factor3，IRF3）、干扰素调节因子7（IRF7）、干扰素α（IFN-α）、干扰素β（IFN-β）的mRNA表达量变化；　　（2）免疫印迹法（Western-blot）检测RSV感染A549细胞各组在4h、8h、12h和24 h的TLR3、TLR7蛋白水平的变化。　　（3）酶联免疫吸附法（ELISA）检测感染不同时间点细胞培养上清中IFN-α、IFN-β、TNF-α、IL-1β含量的变化。　　（4）空斑形成实验（plaque forming unit，PFU）测定感染A549细胞的RSV病毒滴度以及各组病毒增殖情况。　　结果：　　①在mRNA转录水平，感染组上调TLR3/7、IRF3/7、IFN-α/β的mRNA基因表达；在两沉默组，TLR3/7、IRF3/7、IFN-α/β的mRNA较感染组相同时间点的表达量明显减少，减少有统计学差异；TLR3 siRNA沉默组，IFN-β下降较IFN-α更为显著，而在TLR7 siRNA沉默组，IFN-α下降较IFN-β更为显著。　　②在蛋白表达水平，RSV感染组上调 TLR3、TLR7蛋白的表达；在两沉默组，TLR3和TLR7蛋白量比感染组相同时间点的表达量减少；且在TLR3 siRNA沉默组，TLR3蛋白量下降较TLR7更明显，TLR7 siRNA沉默组，TLR7的蛋白表达量较TLR3蛋白量下降更明显；　　③RSV感染A549细胞后，明显上调细胞培养上清中IFN-α/β和炎性因子TNF-α、IL-1β的分泌量，两沉默组IFN-α/β的量均下降，炎性因子的量升高，在TLR3 siRNA沉默组IFN-β较IFN-α下降的更明显，炎性因子升高的更明显；TLR7 siRNA沉默组IFN-α的量下降的更明显。　　④RSV感染组，病毒增殖滴度随时间的延长而上调；两沉默组的病毒增殖滴度都较感染组高，且 TLR3 siRNA沉默组较TLR7 siRNA沉默组病毒增殖滴度更高。　　结论：　　本实验证明，RSV感染A549细胞后，TLR3及TLR7被活化能够抵抗呼吸道合胞病毒感染，分别通过IRF3和IRF7途径诱导产生I型干扰素，发挥了抗病毒免疫；而抗病毒免疫反应中TLR3途径可能更占主导地位；且由TLR3诱导产生的最主要I型干扰素是IFN-β，由TLR7诱导产生的最主要I型干扰素是IFN-α。