缺血后处理对大鼠减体积肝移植术后移植肝保护作用的实验研究

来源 :中南大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dxseu
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
第一章大鼠60%减体积肝移植(RSLT)模型的建立目的:探讨大鼠60%减体积肝移植(RSLT)模型的建立方法,为减体积肝移植的相关后续研究奠定基础。方法:参照Omura等的报道,在Kamada“二袖套法”基础上建立大鼠60%RSLT模型,移除供肝左外侧叶及尾状叶修整为60%减体积供肝,共施行50例大鼠60%减体积肝移植手术。结果:前22例主要用于手术方法及技巧练习,在28例定型手术中,供体手术时间约为25±5min,供肝热缺血时间为0-1min,供肝修整时间约为15±3min,无肝期平均为20±2min,手术成功率为85.7%(24/28)。结论:该模型稳定可靠,可为减体积肝移植的基础及临床相关研究提供较为理想的研究手段。第二章缺血后处理对大鼠减体积肝移植术后移植肝缺血-再灌注损伤的保护作用目的:验证缺血后处理对大鼠减体积肝移植术后移植肝缺血-再灌注损伤的保护作用及初步探讨其可能机制。方法:雄性SD大鼠分别用作供、受体,按照第一部分的方法建立60%减体积肝移植模型,根据供肝开放门静脉灌注时是否采取缺血后处理及缺血后处理方式将受体大鼠分为单纯缺血.再灌注损伤组(IRI组)、缺血后处理1组(IPO 1组)、缺血后处理2组(IPO 2组)、缺血后处理3组(IPO 3组),另设假手术组(SO组)。分别于供肝再灌注后2h、6h处死各组动物,取外周血检测血清ALT、AST,取新鲜肝组织检测髓过氧化物酶(MPO)、超氧化物岐化酶(SOD)及丙二醛(MDA)的含量,HE染色作组织病理学检查,免疫组织化学染色观察细胞间粘附分子-1(ICAM-1)的表达。结果:供肝再灌注后2h、6h各时点,IPO 2组及IPO 3组的大鼠血清ALT、AST水平及肝组织MPO、MDA水平明显低于IRI组和IPO1组(p<0.05),肝组织SOD水平明显高于IRI组和IPO 1组(p<0.05),再灌注6h点IRI组及IPO 1组的供肝ICAM-1表达水平较IPO2组及IPO 3组明显增高(p<0.05),但IPO 2组和IPO 3组、IRI组和IPO 1组间各指标无明显差异(p>0.05)。光镜下HE染色见IPO 2组和IPO 3组肝组织损伤较IRI组和IPO 1组为轻。结论:缺血后处理可以对大鼠减体积肝移植术后供肝缺血-再灌注损伤提供保护作用。其机制可能与激活再灌注损伤后机体内源性抗氧化系统,抑制氧自由基生成及中性粒细胞活化粘附等有关。缺血后处理对移植肝再灌注损伤的保护作用有“节奏”的限制,只有一定的开放-阻断持续时间才能起到抗缺血-再灌注损伤的作用。第三章缺血后处理对大鼠减体积肝移植术后肝细胞增殖的影响及其机制的初步探讨目的:观察缺血后处理对大鼠减体积肝移植术后肝细胞增殖的影响作用并初步探讨其机制。方法:雄性SD大鼠分别用作供、受体,按照第一部分的方法建立60%减体积肝移植模型,根据供肝开放门静脉灌注时是否采取30秒开放-30秒阻断反复3个循环的缺血后处理将受体大鼠分为单纯缺血.再灌注损伤组(IRI组)及缺血后处理组(IPO组),另设假手术组(SO组)。分别于供肝再灌注后2h、6h及24h处死各组动物,取新鲜肝组织检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、信号转导及转录活化因子3(STAT-3)及细胞周期蛋白D1(CyclinD1)的含量,免疫组织化学染色观察肝内增殖细胞核抗原(PCNA)的表达。结果:供肝再灌注6h后,肝内PCNA表达明显增多,与IRI组相比,IPO组复灌后6h、24h时肝内PCNA表达强度明显增高(p<0.05);供肝再灌注再灌注2h、6h时,IPO组肝组织TNF-αmRNA的表达明显低于IRI组(p<0.05),到再灌注24h时,二组间肝组织TNF-αmRNA的表达无明显统计学差异(p>0.05);再灌注2h时,IRI组及IPO组肝组织IL-6、STAT3 mRNA的表达无明显统计学差异(p>0.05),再灌注6h、24h时,IPO组肝组织IL-6、STAT3 mRNA的表达均明显高于IRI组(p<0.05);Cyclin D1 mRNA的表达高峰出现较晚,为再灌注后24h时点,在再灌注2h时,二组间肝组织CyclinD1 mRNA的表达无明显统计学差异(p>0.05),但在再灌注6h、24h时,IPO组肝组织Cyclin D1 mRNA的表达均明显高于IRI组(p<0.05)。结论:IPO可降低缺血再灌注损伤后早期细胞因子TNF—α水平的过高表达,减轻缺血再灌注损伤。IPO对大鼠减体积肝移植术后移植肝细胞的增殖有一定的促进作用,其机制可能与激活信号通路TNF-α/IL-6/STAT3进而上调IL-6及STAT3的表达有关。第四章缺血后处理对大鼠减体积肝移植术后移植肝细胞凋亡的影响目的:观察缺血后处理对大鼠减体积肝移植术后移植肝细胞凋亡的影响。方法:雄性SD大鼠分别用作供、受体,按照第一部分的方法建立60%减体积肝移植模型,根据供肝开放门静脉灌注时是否采取30秒开放-30秒阻断反复3个循环的缺血后处理将受体大鼠分为单纯缺血.再灌注损伤组(IRI组)及缺血后处理组(IPO组),另设假手术组(SO组)。分别于供肝再灌注后2h、6h及24h处死各组动物,取新鲜肝组织以流式细胞仪检测肝细胞凋亡指数(AI)。结果:SO组再灌注后各时点仅见极少量肝细胞发生凋亡,IRI组及IPO组再灌注后AI值上升明显。与IRI组相比,IPO组复灌后各时点肝内AI值均明显减低(p<0.05)。结论:IPO能够明显抑制大鼠减体积肝移植术后移植肝细胞凋亡,该机制也是IPO保护大鼠减体积移植肝缺血-再灌注损伤的重要机制之一。
其他文献
本文简要论述了路网改建中对沥青路面平整度影响的因素以及提出了确保沥青路面平整度的具体技术措施,以保证行车的舒适性和延长路面的使用寿命。
我国广告已在戛纳国际创意节占据了不可忽视的地位,获奖作品同样引领国内广告的发展风向。本文对2008—2019年戛纳国际创意节我国获奖作品的广告主题内容、创意表现、诉求方
变电运行是电网运行的执行机构,是电力系统的骨架,如果变电运行出现故障会给国家、企业及家庭带来不同程度的损失,轻则会损害用户的用电设备及正常供电;重则可能会震荡或瓦解整个
法国著名哲学家、思想家德里达的解构主义理论,其要义在于系统地消解以逻各斯中心主义为理论基础的结构主义,解构传统的语言结构规律性,再对其加以相对论的阐释。这一哲学思
目前,以城市群为主体构建大中小城市和小城镇协调发展的城镇格局正在加速形成。2015年12月,习近平总书记对特色小镇建设作出重要批示,强调抓特色小镇、小城镇建设大有可为,对经济转型升级、新型城镇化建设,都具有重要意义。2016年10月8日,国家发改委印发了《加快美丽特色小(城)镇建设的指导意见》,明确了特色小(城)镇包括特色小镇、小城镇两种形态。特色小镇主
针对镇城底煤矿8#煤层工作面巷道围岩破碎、支护困难等问题,分析了原有巷道支护方式失效的原因,进而针对性的优化了巷道支护参数,采用Φ20 mm×2500 mm左旋螺纹钢锚杆,Φ
研究目的冠状动脉竞争血流与移植血管桥之间相互作用的机制一直以来都没有被阐释清楚,一系列临床研究观察到冠脉竞争血流将降低移植血管的远期通畅性,但是却无法在动物实验中得
首先,对装备管理信息化定义进行界定与分析,并从思想认识、手段建设、信息资源开发等三个方面梳理装备管理信息化建设中存在的问题。之后,提出装备管理信息化建设的基本思路,
目的 门脉高压症(portal hypertension PHT),是以门静脉系统血流动力异常变化为特点,以腹水、脾功能亢进,食管胃底静脉曲张、呕血、黑便等为主要临床表现的一种征候群,约1/3的