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孔雀鱼是一种行为学模式动物，同时又是一种著名的观赏鱼类。作为卵胎生鱼类的一种，孔雀鱼具有独特的卵胎生繁殖方式和与其功能相适应的生殖系统。虽然低温冷冻保存技术已经在200多种鱼类中开展，两种Xiphophorus属的卵胎生鱼类精子的超低温冷冻保存也已获得成功，但孔雀鱼所在的poecila属却从未被研究过。本研究的目的是：1)收集孔雀鱼精子的基本参数；2)建立其精子冷藏保存的条件；3)筛选其精子的最佳超低温冷冻保存方案；4)建立其精子浓度快速测定的方法；5)应用其冻精的人工授精。研究结果表明：1)雄性孔雀鱼的体长、体重和精巢重量彼此之间及精巢重量与精子总数之间均呈显著意义的正相关关系，但精巢与精子密度之间不存在显著意义的关系；2)完整精巢在冰箱中可以保存96h以上，孔雀鱼精子一经收集就开始游动，其精子可在渗透压在200～430mOsmol／kg的离子（HBSS）或非离子（葡萄糖或者蔗糖）溶液中持续游动，并在与其体液等渗（305mOsmol／kg）的稀释液中获得最佳活力，高渗或者低渗均会抑制精子活力；3)25℃或4℃条件下采集精子对其冰箱保存时间长度没有影响；4)解剖后剪碎精巢释放的精子活力显著高于碾碎精巢释放的；5)稀释液的pH值对精子活力具有显著意义的影响；6)1：50～1：500的精子（mg）／稀释液（ml）的稀释比例对冰箱保存时间影响不大；7)4℃冰箱保存时，1.5ml离心管中所盛精液量的大小对精子活力和保存时间的长度有显意义的影响。综合以上结果，得出以Hanks’平衡盐溶液为稀释液和1.5ml离心管为保存容器的精子冰箱保存的适宜条件为：稀释液渗透压为300mOsmol／kg，pH值为5.0～8.0，精子与稀释液的稀释比例1：200（mg：ml），精液量为每个1.5ml离心管100～500μl。超低温冷冻实验结果表明：1)在浓度为5％～20％的范围内，DMSO（二甲基亚砜）、MeOH和DMF（N，N-二甲基甲酰胺）的浓度对精子活力均有显著意义的影响，Gly的浓度变化则对精子活力不具显著意义的影响；2)抗冻剂平衡时间以不超过20min为宜；3)Gly（5％～20％）、DMSO（5％～15％）、MeOH（2％～10％）和DMF（2％～8％）四种抗冻剂对精子均具有一定的抗冻作用，但以Gly的抗冻效果最显著；4)非渗透性抗冻剂蔗糖对孔雀鱼精子的低温冷冻保存没有显著意义的效果；5)孔雀鱼精子对冷冻速率具有较广范围的适应性，以-15～-35℃／min的不同速率将样品温度由4℃降至80℃对解冻后的精子活力没有显著意义的影响；6)0.25ml麦管中所装精液量的大小对解冻后的精子活力没有显著意义的影响；7)解冻前1：20稀释的精样在解冻后活力最好，但1：20～1：120的解冻前和解冻后稀释比例对解冻后精子活力没有有显著意义的影响。综合以上结果，得出以Hanks’平衡盐溶液为稀释液，冻前平衡10min，0.25ml麦管为保存容器的精子超低温冷冻条件为：以14％Gly为抗冻剂，0.25ml麦管内的装管精液量为120μl，以-25℃／min的速率从4℃直接降温至-80℃，平衡5min后直接投入液氮罐中保存，解冻采用40℃水浴7s。用酶标仪于波长405、450、490、630nm下测量精子浓度，其中以405nm和450nto较为敏感，在密度于6×105～4×108cell／ml范围内精子密度和光密度值存在线性相关关系，但其可信性仍有待进一步验证。将冷冻六个月的精液解冻后，在冷冻离心机上以2000×g离心和洗涤各10min，制备成浓度为2×109cell／ml的精悬液，与处女鱼进行人工授精，可以产出后代。