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近年来,糖尿病患病人数呈逐年增长趋势。据国际糖尿病联盟预测,2045年全球糖尿病患病人数将高达6.29亿。而目前临床上治疗糖尿病的药物通常会引起一些副作用,严重降低人们的生活质量。因此,开发研制一种天然、无副作用的新型降糖药物或辅助治疗药物变得至关重要。乳酸菌因其价格低廉、易获得和安全等特点,逐渐成为糖尿病防治的研究热点。研究证实,乳酸菌或其发酵食品均对糖尿病起到一定的改善作用,但由于其机制尚不明确,因此还需对乳酸菌的降糖机制进行更深入的研究。本课题通过对-硝基苯基-α-D-吡喃葡萄糖苷体外筛选方法对实验室保存的8株分离自西藏地区发酵乳制品中的副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)进行体外降血糖能力的评价,筛选出降血糖能力最强的L.paracasei TD062作为研究对象。然后利用模拟胃肠道环境的方法测定L.paracasei TD062对酸、胆盐和人工胃肠液的耐受性,评估其体内存活的能力。其次构建动物模型,通过体内实验评价L.paracasei TD062对糖尿病小鼠的改善作用。最后利用real-time RT-PCR技术对其降糖机制进行探究。通过上述研究得到如下结果:1、利用体外筛选方法对8株L.paracasei的α-葡萄糖苷酶活性的抑制效果进行评估,发现8株菌株对α-葡萄糖苷酶有不同程度的抑制作用。其中,L.paracasei TD062的α-葡萄糖苷酶抑制率最高,为31.89%,表现出最强的体外降血糖能力。因此本课题选取L.paracasei TD062作为后续研究对象。2、L.paracasei TD062在pH 3.0的条件下培养3 h后,菌株的存活率达到91.08%,活菌数为7.45 log cfu/mL;在含0.3%的胆盐培养基中培养4 h后,菌株的存活率达到85.45%,活菌数为6.99 log cfu/mL;在人工模拟胃液、肠液中培养后,菌株的存活率分别为89.98%和79.95%,活菌数分别为7.36 log cfu/mL和6.54 log cfu/mL,降低了2个数量级。由结果可知,L.paracasei TD062具有良好的耐酸、耐胆盐以及耐人工胃肠液的能力。3、利用高脂高糖饮食和小剂量链脲佐菌素构建糖尿病模型,对菌株的体内降血糖能力进行评估。在经过13周的实验后,发现L.paracasei TD062可有效降低糖尿病小鼠的餐前餐后血糖、脏器指数、糖基化血红蛋白以及胰岛素等基础指标的水平,同时能够有效抑制体重的降低,提高葡萄糖耐受性,并可显著改善血脂紊乱、氧化应激和炎症反应水平。4、提取小鼠的肝脏总RNA,利用real-time RT-PCR技术检测胰岛素信号传导通路和糖代谢过程中关键基因的表达水平变化。经L.paracasei TD062作用后,糖尿病小鼠中PEPCK、G-6-Pase和GSK-3β基因表达量呈现不同的下调趋势,与模型组相比差异显著(P<0.05)。同时该菌株显著上调IRS-2、PI3K和Akt的基因表达量,且在一定程度上呈现剂量依赖性。结果表明L.paracasei TD062的降糖机制可能是通过激活PI3K/Akt信号通路,调控下游因子的表达,提高机体对胰岛素的敏感性,调节糖代谢水平,从而达到降低血糖的目的。