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目的：研究中药单体成分黄芩苷对治疗支气管哮喘的药效学考察，并初步探讨其对苦味受体的作用机制。方法：1雾化吸入法测定黄芩苷对豚鼠引喘潜伏期的影响。2离体气管片法测定不同浓度黄芩苷对豚鼠气管舒张作用。3耳肿胀法测定黄芩苷的抗炎作用。4MTT法检测黄芩苷对HBSMC细胞活性影响。5血常规测定不同浓度（5、10、25mg/ml）黄芩苷对哮喘模型大鼠血液中WBC、NEUT%、EO%、BASO%的影响。6HPLC测定雾化吸入10mg/ml黄芩苷1h后，不同时间段（0.5h、1h、2h、4h、8h、24h、48h）小鼠肺脏和血液中黄芩苷浓度。7构建pcDNA3.1（+）/GFP/hTAS2R14质粒并转染HBSMC细胞，荧光显微镜下观察转染效率，琼脂糖凝胶电泳法验证hTAS2R14在HBSMC细胞上的表达情况。8pcDNA3.1（+）/GFP/hTAS2R14质粒转染HEK293T细胞，荧光素酶法检测不同浓度（10-9～10-4mol/L）黄芩苷对hTAS2R14表达影响。9激光共聚焦钙离子成像法检测黄芩苷（1mmol/ml）对已转染hTAS2R14基因的HEK293T细胞内钙离子浓度影响。结果：1黄芩苷对豚鼠引喘潜伏期的影响雾化吸入法测定引喘潜伏期实验发现，给药后各组引喘潜伏期均有不同程度延长，但黄芩苷组与阳性药组较正常对照组延长时间更长，同时，黄芩苷组（5mg/ml黄芩苷水溶液）的引喘潜伏期时间显著高于阳性药组（5mg/ml沙丁胺醇溶液）。2不同浓度黄芩苷对豚鼠气管舒张作用气管片张力实验测定黄芩苷对豚鼠气管舒张作用发现，黄芩苷高剂量组对乙酰胆碱刺激收缩的豚鼠离体气管片舒张率略低于多索茶碱组（为43.07%），且舒张趋势较多索茶碱组平缓，但舒张作用持续时间长于多索茶碱。黄芩苷低剂量组对正常气管无舒张作用，但也可在一定程度上舒张被乙酰胆碱刺激收缩的豚鼠离体气管片，最大舒张率为24.63%，且具有剂量依赖性。3黄芩苷的抗炎作用小鼠耳肿胀法测定黄芩苷对小鼠的抗炎作用，通过测定耳片厚度发现黄芩苷（10mg/ml）能够有效对抗二甲苯所致的小鼠耳肿胀，给药后不同时间段（1h、2h、6h）黄芩苷组小鼠耳片厚度均低于模型组，其作用效果与阳性药（皮炎平软膏）组相比，1h、6h黄芩苷组抗炎作用效果略低于阳性药组，2h黄芩苷组抗炎作用与阳性药组基本持平。测定给药后各组小鼠脏器指数发现，黄芩苷组耳片指数差介于阳性药组与模型组之间；脾指数与阳性药组持平，均低于模型组；胸腺指数三组间无显著性差异。4黄芩苷对HBSMC细胞活性影响MTT法测定发现，黄芩苷对HBSMC细胞活性无抑制作用（IC50＞100μM）。5黄芩苷对哮喘模型大鼠血液中WBC、NEUT%、EO%、BASO%的影响通过检测不同剂量黄芩苷（5、10、25mg/ml）干预哮喘模型大鼠血液中WBC、NEUT%、EO%、BASO%，发现模型组大鼠各项血液指标均与正常组大鼠有显著性差异（p＜0.01），同时黄芩苷中剂量组（10mg/ml）与模型组各项大鼠血液指标亦存在显著性差异（p＜0.01），提示哮喘大鼠模型建立成功，且中剂量黄芩苷对哮喘模型大鼠有一定的保护作用。6雾化吸入黄芩苷后，不同时间段小鼠肺脏和血液中药物浓度在本色谱条件下黄芩素与内标化合物分离良好，黄芩苷在0.5～95mg/L内呈线性关系；黄芩苷的最低检测浓度为0.05mg/L。测定黄芩苷（10mg/ml）雾化吸入1h后，48小时内小鼠肺脏中的代谢曲线，我们发现黄芩苷浓度在给药后0.5h首次出现最大值（46.57±0.52mg/L），之后浓度随时间逐渐降低，2h开始逐渐升高，至4h黄芩苷浓度达到第二次高峰（21.67±0.35mg/L），但至48h代谢完全，残留量趋于零。同时测定黄芩苷在小鼠血液中代谢曲线，我们发现黄芩苷在小鼠体内血药浓度在2h达到峰值（4.87±0.54mg/L），之后稍有下降，至4h后逐渐升高，8h后血药浓度趋于平稳（3.58～3.54mg/L），至48h略有升高（4.76±0.23mg/L）。7构建pcDNA3.1（+）/GFP/hTAS2R14质粒并转染HBSMC细胞，观察转染效率，验证hTAS2R14在HBSMC细胞上的表达情况荧光显微镜下观察，发现该质粒能够成功转染HBSMC细胞，转染效率大于60%，提取细胞中质粒，紫外分光光度计检测发现所提质粒纯度良好，浓度适中，PCR反应结果验证所合成的含目的基因的质粒表达良好，且转染效率较高，转染条件可用；同时还发现未被转染的HBSMC细胞中亦含有hTAS2R14基因。8pcDNA3.1（+）/GFP/hTAS2R14质粒转染HEK293T细胞，检测黄芩苷对hTAS2R14表达影响测定已转染目的基因的HEK293T细胞在不同浓度（10-9～10-4）黄芩苷刺激后荧光强度变化，发现荧光强度在10-6～10-4浓度范围内明显增大，且荧光强度与药物浓度存在一定的剂量依赖性，提示黄芩苷可能作用于目的基因hTAS2R14，并促进其表达。9黄芩苷对已转染hTAS2R14基因的HEK293T细胞内钙离子浓度影响黄芩苷（1mmol/L）对已转染目的基因的HEK293T细胞刺激后，应用激光共聚焦钙离子成像法动态记录细胞内钙离子浓度变化，我们发现在给予黄芩苷刺激后，HBSMC细胞内钙离子浓度在0～5s内迅速增高，在5～40s缓慢降低至初始浓度。结论：黄芩苷在治疗支气管哮喘的过程中，具有良好的体内外抗炎效果和气管松弛作用，在作用过程中对支气管平滑肌无损伤作用；雾化吸入后在肺脏中代谢迅速，残留量低；单次给药后在较长时间内，能够维持稳定的血药浓度。同时能够通过苦味受体这一新的途径，间接调节细胞内钙离子通道，舒张支气管平滑肌。因此，中药单体成分黄芩苷是一个具有良好的治疗哮喘作用，低毒性的新型抗哮喘的化合物，具有良好的开发前景。