论文部分内容阅读
目的：错配修复(mismatch repair, MMR)基因与结肠癌的发生关系密切,是结肠癌化疗的潜在预测因子。本研究旨在探讨结肠癌MMR状态与伊立替康(CPT-11)敏感性之间的关系,明确MMR对一线接受CPT-11为化疗基础的转移性结肠癌的疗效预测及预后作用。方法：入组184例转移性结肠癌患者,他们均接受以CPT-11为化疗基础的一线治疗。随访3年无进展生存期(PFS)和总生存期(OS)。免疫组化法确定MMR状态,分析它与患者的临床病理特征之间的关系；Cox比例风险回归模型筛选和评估对预后的独立影响因素；生存曲线采用Kaplan-Meier法和log-rank检验。培养结肠癌细胞系HCT-116和SW480,通过hMLH1基因过表达和沉默构建两组MMR基因正常表达(pMMR)和MMR基因表达缺失(dMMR)相对照的细胞。检测各组细胞内胸苷酸合成酶(TS)的表达水平。MTT法检测CPT-11对各组细胞的抑制率,采用ANOVA和SNK检验法评估IC50的变化。并在不同浓度CPT-11作用后继续培养24小时,使用定量蛋白印迹(western blotting)和聚合酶链式反应(qPCR)法检测细胞内TS表达水平变化。所有检验方法均为双侧分布,并且认为当p<0.05时才具有统计学意义。结果：MMR蛋白表达缺失率约为·18.5%,在近端结肠(P=0.005)或低分化组织(P=0.018)中常见。pMMR患者的疾病控制率(DCR)为66.2%,dMMR为84.8%,差异有统计学意义(p=0.037)。dMMR患者的平均PFS为8.6个月(95%CI7.1-10.0个月),pMMR为6.6个月(95%CI6.0-7.3个月),差异具有统计学意义(P=0.018)。dMMR和pMMR的平均OS分别为17.5个月(95%CI16.7-18.3个月)和18.7个月(95%CI17.0-20.4个月),但无统计学差异(p=0.246)。dMMR结肠癌细胞(SW480-shRNA-hMLH1、HCT-116hMLH1Vector)对CPT-11更敏感。CPT-11作用后,细胞内TS的表达水平均较未经CPT-11处理组有所下降,并且在dMMR细胞中下降更显着,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论：MMR在结肠癌组织中表达缺失,dMMR好发于近端结肠,低分化组织中,与TS表达水平无相关性。dMMR是转移性结肠癌患者一线接受CPT-11为基础化疗的良好的疗效预测因子。dMMR结肠癌细胞系对CPT-11更敏感。CPT-11下调结肠癌细胞内TS表达水平,并且在dMMR结肠癌细胞中下调作用更显著。