目的：乳腺癌是妇女最常见的恶性肿瘤，严重危害广大女性的身心健康。洛铂是第三代铂类抗癌药物，其抗癌治疗指数高于顺铂和卡铂，对一部分顺铂和卡铂耐药的肿瘤患者有效，且毒副作用比顺铂、卡铂等药物均低。目前，洛铂常被用于治疗乳腺癌和小细胞肺癌等，但作用机制尚不十分清楚。IL-2作为增强机体免疫功能的药物，能促进淋巴细胞增殖，促进免疫细胞杀伤肿瘤细胞。洛铂和IL-2联合用药是临床治疗乳腺癌的一个新方案。但IL-2对体外培养肿瘤细胞的作用研究还不多，结论不明确。本研究探讨了IL-2、洛铂以及洛铂和IL-2联合应用对乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231体外增殖的抑制作用，以及对乳腺癌细胞内p53、syk和c-myc基因表达的影响。　　 方法：　　 1细胞株及其培养人乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231用含10％胎牛血清、100mg/ml青霉素、100U/ml链霉素的RPMI1640培养基于37℃、5％CO2培养箱中培养。　　 2细胞增殖试验取对数生长期的MCF-7和MDA-MB-231细胞作为实验对象，分别设实验组如下，不同浓度洛铂（1.25、2.50、5.00、10.00、20.00μg/ml）、IL-2（3125、6250、12500、25000、50000、100000IU/ml）、IL-2（25000IU/ml）联合不同浓度洛铂（1.25、2.50、5.00、10.00、20.00μg/ml），计算不同剂量药物对细胞的增殖抑制率。　　 3细胞形态学变化取对数生长期的MCF-7和MDA-MB-231细胞作实验对象，分别设实验组如下，不同浓度洛铂（1.25、5.00、10.00μg/ml）、IL-2（25000、100000IU/ml）和IL-2（25000IU/ml）联合不同浓度洛铂（1.25、5.00、10.00μg/ml），以及对照组，把不同实验组或对照组的细胞经瑞氏-姬姆萨染色后，普通光学显微镜下观察细胞形态。　　 4细胞凋亡的检测收集经不同浓度洛铂（1.25、5.00、10.00μg/ml）、IL-2（25000、50000、100000IU/ml）和IL-2（25000IU/ml）联合不同浓度洛铂（1.25、5.00、10.00μg/ml）作用24小时的MCF-7和MDA-MB-231细胞，PBS缓冲液洗涤细胞3次，调整细胞浓度为1×106/ml，流式细胞仪检测，Single histogram statistic软件分析细胞凋亡率。　　 5半定量RT-PCR技术检测MCF-7和MDA-MB-231细胞syk、p53、c-myc mRNA表达MCF-7和MDA-MB-231细胞分别经不同浓度洛铂、IL-2和IL-2联合不同浓度洛铂（浓度分组同上4）作用24小时，用Trizol试剂法提取细胞总RNA，进行逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR），分析Syk、p53、c-myc、β-actin mRNA表达。　　 6统计学分析所有数据采用SPSS13.0软件进行统计分析，实验结果以x±s表示，两个独立样本组间均数比较用t检验，多组的组间比较用方差分析，p<0.05表示差异有显著性。　　 结果：　　 1洛铂对MCF-7和MDA-MB-231细胞增殖有明显抑制作用当浓度范围在1.25～20.00μg/ml时，洛铂能明显抑制MCF-7和MDA-MB-231细胞体外增殖反应，呈现量效和时效关系（p<0.05），其中20μg/ml洛铂对MCF-7和MDA-MB-231作用72小时的抑制率分别为63.69％和76.00％。　　 2 IL-2对MCF-7和MDA-MB-231细胞增殖有抑制作用当剂量范围为3125～100000IU/ml时， IL-2对MCF-7和MDA-MB-231细胞的体外增殖抑制作用也呈现量效和时效关系（p<0.05），其中100000IU/ml IL-2作用72小时对MCF-7和MDA-MB-231的抑制率分别为34.03％和19.57％。　　 3洛铂和IL-2联合应用对MCF-7和MDA－MB－231细胞增殖抑制率比单用洛铂高联合应用中相同剂量洛铂和相同作用时间的实验组细胞增殖抑制率较单独应用洛铂时增强（p<0.05）。其中20.00μg/ml洛铂与25000 IU/ml IL-2联合作用72小时，MCF-7和MDA-MB-231细胞的抑制率分别为79.00％和82.29％，而单独应用洛铂的细胞增殖抑制率分别为63.69％和76.00％。　　 4 IL-2处理组MCF-7和MDA-MB-231细胞形态无明显改变瑞氏-姬姆萨染色染色结果显示，25000IU/ml IL-2处理24小时后，MCF-7和MDA-MB-231无明显形态学改变。　　 5洛铂处理组和联合处理组MCF-7和MDA-MB-231细胞形态呈现凋亡前期的形态学改变瑞氏-姬姆萨染色染色结果显示，1.25μg/ml洛铂处理24小时后或1.25μg/ml洛铂和25000IU/ml IL-2联合作用后，MCF-7和MDA-MB-231细胞形态均呈现凋亡前期形态学改变。　　 6洛铂能诱导MCF-7和MDA-MB-231细胞凋亡流式细胞术检测结果显示，对于MCF-7细胞，1.25μg/ml、5.00μg/ml、10.00μg/ml单独洛铂作用24小时，细胞凋亡率分别为18.40％、21.49％、31.57％。对于MDA-MB-231细胞，1.25μg/ml、5.00μg/ml、10.00μg/ml单独洛铂作用24小时，细胞凋亡率分别为6.15％、16.33％、20.39％。可见随着洛铂浓度的增高，两种细胞凋亡率呈现升高趋势。　　 7 IL-2不能诱导MCF-7和MDA-MB-231细胞凋亡流式细胞术检测结果显示，25000IU/ml、50000IU/ml、100000IU/ml单独IL-2作用24小时，MCF-7细胞凋亡率分别为3.79％、2.43％、3.31％，MDA-MB-231细胞凋亡率分别为7.55％、8.96％、9.64％。与对照组（MCF-7和MDA-MB-231细胞分别为2.91％和8.67％）比较无显著性差异（p>0.05）。　　 8洛铂和IL-2联合应用与单用洛铂组比较，MCF-7和MDA-MB-231细胞凋亡率有所增加当25000IU/ml IL-2分别与1.25μg/ml、5.00μg/ml、10.00μg/ml洛铂联合作用24小时后，MCF-7细胞凋亡率分别为27.01％、34.84％、40.86％，MDA-MB-231细胞凋亡率分别为6.83％、19.30％、25.48％，与相同浓度单用洛铂组细胞凋亡率比较有所增加（p<0.05）。　　 9洛铂或IL-2，以及两种联合作用对MCF-7和MDA-MB-231细胞syk、c-myc、p53 mRNA表达的影响不一半定量RT-PCR检测结果显示，对于MCF-7细胞，在单独应用不同浓度洛铂（5.00μg/ml、10.00μg/ml）和单独应用IL-2（25000IU/ml、50000IU/ml、100000IU/ml）时，各实验组中细胞p53、c-myc、syk mRNA表达水平与对未处理组相比均有所降低（p<0.05）；而当不同浓度洛铂与25000IU/ml IL-2联合应用时，各实验组细胞p53、syk、c-myc mRNA的表达水平与未处理组相比则无显著性差异（p>0.05）。　　 对于MDA-MB-231细胞，在各不同处理组或对照组中均未检出syk mRNA的表达。在单独应用不同浓度洛铂和单独应用不同浓度IL-2时，各实验组细胞p53mRNA表达水平均高于对照组细胞，比较有显著性差异（p<0.05），同时各实验组细胞c-myc mRNA表达水平均低于对照组细胞，比较有显著性差异（p<0.05）。当不同浓度洛铂与25000IU/ml IL-2联合应用时，实验组细胞中p53、c-myc mRNA表达变化不同，与未处理组相比有显著性差异（p<0.05），而与相同浓度单独应用洛铂实验组比较无显著性差异（p>0.05）。　　 结论：　　 1在体外洛铂能明显抑制MCF-7和MDA-MB-231细胞增殖，且具有明显的量效和时效关系。并能诱导细胞凋亡。　　 2在体外IL-2对MCF-7和MDA-MB-231细胞增殖有抑制作用，具有量效和时效关系。但不能诱导细胞凋亡。　　 3洛铂和IL-2联合应用，对MCF-7和MDA-MB-231细胞增殖的抑制作用高于单用洛铂的作用。并仍能诱导细胞凋亡。　　 4对于MCF-7细胞，单独应用洛铂或IL-2能下调细胞内p53、syk、c-myc mRNA的表达。而当两种药物联合应用时三种不同基因表达水平无明显下降。　　 5对于MDA-MB-231细胞，单独应用洛铂或IL-2，与两者联合应用，都能上调细胞中p53 mRNA的表达；单独应用洛铂时c-myc表达无变化，当洛铂与IL-2联合应用时c-mycmRNA的表达下调。而syk mRNA基因在各实验组或对照组中均未检出。　　 6洛铂或IL-2对乳腺癌细胞内抑癌基因p53、syk和原癌基因c-myc的农达调控，在不同细胞类型中不一样。