U50488H调节细胞的信号转导机制的研究及雌激素对KORmRNA表达的调节作用

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该实验通过构建能够灭活IP<,3>的人磷酸酶IP<,3>P表达基因,建立CNE2稳定过表达IP<,3>P的细胞系,分析IP<,3>是否参与了U50488H(KOR特异性激动剂)调节CNE2细胞系的增殖和凋亡.同时为了探讨DAG的作用也建立了DAG激酶(DGKε)稳定表达细胞系.实验还观察了U50488H对人HERG基因编码的I<,Kr>的调节作用,以及雌激素对CNE2细胞KORmRNA表达的调节.结论:1、成功构建了人IP<,3>P基因表达载体并建立了CNE2-IP<,3>P稳定表达细胞系.2、U50488H能够抑制细胞CNE2的生长和增殖,且具有浓度依赖性.3、U50488H对CNE2细胞的早期作用是使细胞线粒体膜电位值减小.4、PLC/IP<,3>是U50488H抑制CNE2细胞生长和增殖的重要信号传导通路.5、成功建立了DOS7-DGKε稳定表达细胞系.6、建立了HEK293-HERG稳定表达细胞系.7、U50488H能够剂量依赖性地抑制HERG基因编码的I<,Kr>.8、雌激素可以调节CNE2细胞KOR mRNA水平.
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