南荻MlCCoAOMT1基因的克隆与功能鉴定

来源 :兰州大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:woailzm002
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木质素是一种复杂的芳香族聚合物,其合成从苯丙氨酸起始,涉及多种酶的参与。CCoAOMT是木质素合成途径中的关键酶之一,在G和S木质素单体合成中发挥着重要作用。研究南荻MICCoAOMT1基因及其功能,有利于我们正确认识木质素的合成及调控,为南荻的遗传改造提供理论基础。本研究从南荻中克隆到MICCooAOMT1基因,通过Real Time-PCR实验分析了 M/CCoAOMT1基因在南荻不同组织器官中的表达,结果表明其在叶鞘和茎中表达较高;并通过RNA原位杂交实验,探究其在南荻茎中的表达,结果发现其主要在厚壁组织中表达。通过农杆菌介导的遗传转化将MICCoAOMT1基因分别转入拟南芥野生型和ccoaomt突变体中,获得相应的过表达和恢复系植株。通过对拟南芥野生型和ccoaomt突变体及相应的过表达和恢复系植株的表型进行分析,发现ccoaomt突变体中次生木质部发生塌陷,MICCoAOMT1过表达植株中次生细胞壁有加厚的现象,而MICCoAOMT1恢复系植株中塌陷的木质部恢复正常;另对拟南芥野生型和ccoaomt突变体及相应的过表达和恢复系植株的木质素含量进行测定,结果表明ccoaomt突变体中木质素含量明显降低,MICCoAOMT1过表达系植株中木质素的含量升高,恢复系植株木质素含量虽没有达到野生型水平,但是比突变体植株木质素含量明显升高。以上结果表明,南荻MICCoAOMT1基因与拟南芥CCoAOMT的功能同源,在木质素合成过程中发挥重要作用。
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