【目的】探索EGR1对乳腺癌上皮间质转化的影响,以及EGR1对乳腺癌远处转移可能的作用机制。【方法】通过生物信息学分析EGR1在乳腺癌和正常乳腺组织中的表达,以及其与生存的相关性。应用实时荧光定量PCR（q RT-PCR）检测不同乳腺癌细胞系中EGR1的基础表达量,选择低表达EGR1的细胞系构建过表达EGR1的稳转细胞株。体外实验研究过表达EGR1对乳腺癌迁移、侵袭能力和EMT表型的影响:Transwell实验观察乳腺癌侵袭和迁移能力的变化;Western blot实验和免疫荧光实验检测EMT相关分子的表达,并进一步探讨EGR1对EMT的调控中NFκB/p65信号通路的作用。通过Jaspar网站预测,发现EGR1与CD47分子启动子区域存在结合位点,通过Ch IP实验,检测EGR1与CD47启动子区域之间的结合关系,并通过Western blot实验检测EGR1对CD47的调控以及CD47对乳腺癌EMT表型的影响。将肿瘤细胞分别与THP1分化而来的巨噬细胞和骨髓来源的巨噬细胞共培养,并通过流式细胞术检测了EGR1对巨噬细胞吞噬能力的影响。最后,通过Western blot实验检测小分子化合物双硫仑对乳腺癌中EGR1的调控作用。在体内研究中,我们利用阴性对照组和EGR1稳定高表达组MDA-MB-231细胞构建了乳腺癌原位移植瘤模型和尾静脉转移模型用来观察EGR1对肿瘤生长和转移的作用。在乳腺癌原位移植瘤模型中,观察两组小鼠瘤体的体积大小,通过免疫组化检测两组荷瘤小鼠肿瘤组织中EGR1、CD47和EMT、NFκB通路相关分子变化;在尾静脉转移模型中,比较两组小鼠肺转移和肝转移情况。【结果】通过对TCGA和GEO数据库的分析发现:EGR1在乳腺癌组织中的表达显著低于正常乳腺组织,且EGR1的表达与乳腺癌患者生存预后显著相关,EGR1高表达组患者生存要明显优于EGR1低表达组患者。q RT-PCR实验检测正常乳腺细胞MCF10A和乳腺癌细胞系MCF-7、SKBR3、T47D、MDA-MB-231和BT549中EGR1的基础表达量,结果显示EGR1在MCF10A中明显高表达,而在MCF-7、SKBR3、T47D、MDA-MB-231和BT549中表达较低。我们选择低表达EGR1的MDA-MB-231和BT549细胞系构建了稳定高表达EGR1的细胞株。Transwell实验显示EGR1过表达减弱了乳腺癌细胞的侵袭和迁移能力;Western blot和免疫荧光结果显示EGR1过表达上调了上皮标志E-cadherin,下调了间质标志Ncadherin和Vimentin,逆转了EMT表型。进一步检测NFκB/p65通路相关分子的表达,发现EGR1可以下调NFκB/p65信号通路。EGR1可以抑制NFκB通路的激活剂TNFα对p65核转位的促进作用并抑制NFκB活化诱导的EMT表型。EGR1可以下调免疫检查点CD47的表达,并且敲低CD47的表达逆转EMT表型。生信分析发现EGR1与CD47分子启动子区域可能存在结合,Ch IP-q PCR实验证实EGR1与CD47启动子区域存在结合,EGR1在转录水平调节CD47的表达。肿瘤细胞与巨噬细胞共培养后流式结果显示EGR1过表达促进了巨噬细胞对肿瘤细胞的吞噬作用。此外,Western blot检测发现小分子化合物双硫仑在体外可以明显上调EGR1的表达。乳腺癌原位移植瘤模型的体内实验表明:过表达EGR1明显抑制肿瘤细胞的生长,免疫组化结果显示过表达EGR1上调上皮标志物E-cadherin,下调间质标志物N-cadherin,并下调p65、CD47及Ki67等。尾静脉转移模型的体内实验显示:与阴性对照组相比,EGR1高表达组明显降低了乳腺癌肺转移、肝转移率。【结论】EGR1的表达与乳腺癌的良好预后生存相关。在乳腺癌中EGR1可以抑制肿瘤细胞EMT进程进而抑制乳腺癌的远处转移:EGR1可以通过抑制NFκB/p65通路途径和直接转录抑制CD47分子途径,从而抑制乳腺癌EMT。此外,EGR1在免疫微环境中具有调控巨噬细胞吞噬作用的潜力。小分子化合物双硫仑可能通过上调乳腺癌细胞中EGR1的表达发挥抑制肿瘤的作用,为双硫仑治疗乳腺癌提供了新的证据。