杆状病毒介导的钠碘转运体应用于人下咽癌分子成像和核素基因治疗的可行性研究

来源 :上海交通大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ponny2006
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目的探讨杆状病毒介导的钠碘转运体(sodium/iodine symporter,NIS)应用于人下咽癌分子成像和核素基因治疗的可行性。方法通过Bac-to-Bac杆状病毒表达系统分别包装含绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)和NIS的重组杆状病毒(Bac-GFP和Bac-NIS)。用流式细胞仪检测不同感染复数(multiplicity of infection,MOI)的Bac-GFP在丁酸钠作用下对人下咽癌细胞(FaDu)的转导效率,并用间接免疫荧光检测NIS在FaDu细胞的定位表达;进行NIS介导的碘摄取、动态摄碘和NaClO4碘摄取抑制实验;检测共转染了Bac-GFP和Bac-NIS的FaDu细胞中的荧光强度和放射性计数;进行NIS介导的131I杀伤FaDu细胞的克隆形成实验。结果在丁酸钠的作用下,Bac-GFP在MOI为400时对FaDu细胞的转导效率可达95.16%;NIS可准确定位在FaDu细胞膜上,具备摄碘功能;放射性计数和荧光强度之间为线性正相关(相关系数为0.971),可通过放射性计数的变化来反映荧光强度的变化;NIS介导的131I对FaDu细胞具有明显的杀伤作用。结论首次证实了杆状病毒对FaDu细胞具有很高的转导效率,为下咽癌的基因治疗提供了一个新的病毒载体;验证了Bac-NIS可有效地介导FaDu细胞的碘摄取;体外证明了NIS介导的125I可用于下咽癌的分子成像和介导的131I可用于下咽癌的核素基因治疗。
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