论文部分内容阅读
目的低强度激光生物刺激效应在伤口愈合和组织修复上的作用,明确指出了低强度激光生物刺激效应能影响多种细胞的功能行为,而且可能同时产生这些影响。但是,低强度激光生物刺激效应的确切机制目前仍然不清楚。为阐明低强度激光生物刺激效应的机制,需要更多细胞和分子水平的深入研究。激光辐照的生物效应取决于激光的波长、功率和照射剂量等。迄今为止,研究激光辐照巨噬细胞的生物效应实验多采用He-Ne激光,而650nm、532nm波长激光却很少涉及。本论文拟研制能够输出两种波长激光的双波长半导体激光治疗仪,然后建立一种小鼠腹腔巨噬细胞的分离和培养方法,进而研究低强度650nm、532nm激光辐照对小鼠腹腔巨噬细胞功能的影响。方法⑴双波长半导体激光治疗仪采用单片机AT89S51智能控制,通过人机对话接口实现对输出功率、工作时间的连续调节;⑵用不含小牛血清的RPMI-1640培养液灌洗小鼠腹腔,分离获取小鼠腹腔巨噬细胞,在含有10%小牛血清的RPMI-1640培养液中培养。采用倒置显微镜观察细胞形态,台盼蓝染色计算存活率,瑞氏染色计算纯度;⑶用不同功率和照射时间的650nm、532nm激光辐照小鼠腹腔巨噬细胞,采用中性红吞噬实验测定小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力;⑷用10mW的低强度650nm、532nm激光辐照小鼠腹腔巨噬细胞,时间分别为1d、3d、5d、7d、9d,每天照射10min,采用比色法测定小鼠腹腔巨噬细胞LDH和ACP活性。结果⑴双波长半导体激光治疗仪可以输出650nm、532nm两种波长激光,输出功率、工作时间连续可调;⑵论文设计的实验方法获得的小鼠腹腔巨噬细胞纯度较高,具备巨噬细胞的形态特征;⑶在适当的激光功率和照射时间时,小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力有显著性增强,并且相同功率的低强度650nm、532nm激光照射后小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力随照射时间的变化规律相似,532nm激光照射后的巨噬细胞吞噬能力强于650nm激光;⑷低强度650nm、532nm激光照射后小鼠腹腔巨噬细胞的LDH和ACP活性显著增强,并且LDH和ACP活性随照射时间的增加呈先增大后减小的趋势,在7d时达到最大,9d时减小。结论⑴研制的双波长半导体激光治疗仪能够输出两种波长激光,输出功率和工作时间可以连续调节,体积小、操作简单,适用于临床照射治疗,具有非常好的应用前景;⑵所设计的实验方法能获得较高纯度的小鼠腹腔巨噬细胞,是一种简便实用的小鼠腹腔巨噬细胞分离培养方法;⑶实验结果表明适当剂量的低强度650nm、532nm激光照射能显著增强小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力,提高其LDH和ACP活性,对巨噬细胞有激活作用,能增强其免疫活性;⑷实验结果也表明使用激光照射治疗疾病时,应遵照一定的标准参量,并且需要我们继续努力研究不同条件下精确的照射剂量。