目的：　　 光老化是指皮肤受到慢性紫外线损伤后出现的衰老变化，它表现为曝光部位皮肤粗糙、皱纹形成、弹性下降、脆性增加、出现色斑，呈皮革样外观。虽然光老化涉及皮肤各层组织，但上述大部分表现是由皮肤真皮层的组织学改变引起的，其特征性改变为异常弹性纤维在真皮细胞外基质(extracellular matrix,ECM)堆积和胶原蛋白减少。光老化的机制至今未完全阐明，基质金属蛋白酶(matrixmetalloproteinases,MMPs)上调导致胶原蛋白下降是其中最重要的学说之一，但该学说未能解释弹性蛋白堆积的原因，可见仍有其他机制参与其中。我们的前期研究发现，在慢性紫外线照射后的人体皮肤及体外培养的成纤维细胞中，组织蛋白酶(cathepsin)B、D、K、G的mRNA和蛋白表达均出现异常，首次证明组织蛋白酶与皮肤光老化有关。近年有研究发现组织蛋白酶K在介导皮肤成纤维细胞胞内降解弹性蛋白中起重要作用。弹性纤维的堆积实际上是弹性蛋白合成与降解失衡，组织蛋白酶K参与弹性蛋白降解，可能在光老化过程中起重要作用。为更全面了解组织蛋白酶K与光老化的关系，本研究拟检测组织蛋白酶K在慢性日光模拟紫外线照射(solar-simulated ultraviolet radiation,SSR)后的人体皮肤中的活性变化。　　 方法：　　 1.研究对象：　　 纳入志愿者8例，其中男4例，女4例，年龄范围21-26岁，平均年龄24±0.4岁，皮肤光生物学类型为Ⅲ型或Ⅳ型(Fitzpatrick分类)。受试者既往无日光性皮肤病史或光过敏史，近1月无全身或近2周无局部使用光敏感性药物，局部皮肤无外伤及皮疹，实验期间保证实验部位避免日晒及使用光敏性药物。本课题已取得所有志愿者知情同意及伦理委员会批准(中大附三医伦[2009]2-2号)。　　 2.方法：　　 2.1在非曝光部位皮肤(上臀部)行慢性SSR诱导。　　 日光模拟紫外线(30％UVA+70％UVB，光谱为290～400 nm)每天以1MED量照射随机一侧上臀部皮肤，连续5天/周，共6周(SSR诱导组)。另一侧上臀部皮肤作为正常对照组，不作诱导处理。　　 2.2观察是否成功诱导慢性光损伤　　 处理前后拍照，作皮肤外观评估；最后一次诱导后72小时取SSR诱导组及正常对照组皮肤组织作HE染色，镜下观察组织学改变。　　 2.3组织蛋白酶K活性检测　　 取两组皮肤组织制备组织匀浆液，以人工合成的二肽化合物乙酰亮氨酰精氨酰氨甲基香豆素为底物，通过荧光酶标仪检测组织蛋白酶K分解产物7-氨基-4-甲基香豆素释放的荧光，以定量测定组织蛋白酶K的特异活性。　　 3.统计学分析　　 采用SPSS17.0统计软件进行配对样本t检验分析，显著性检验标准为P＜0.05。　　 结果：　　 1.SSR诱导组皮肤经6周慢性SSR处理后，外观及镜下呈明显慢性光损伤改变。　　 2.和正常对照组皮肤相比，SSR诱导组皮肤的组织蛋白酶K活性明显下降；SSR诱导组皮肤组织蛋白酶K的活性为(8.09±5.22)×10-3(nmol/mg·min)，正常对照组皮肤组织蛋白酶K的活性为(117.54±39.01)×10-3(nmol/mg·min)，正常对照组皮肤组织蛋白酶K的活性为SSR诱导组皮肤的14.53倍，P＜0.001，差异有统计学意义。　　 结论：　　 组织蛋白酶K在慢性紫外线损伤后的人体皮肤中活性明显降低，提示组织蛋白酶K与皮肤光老化密切相关。