目的:探讨采用4-1BBL联合sPD-1及单独使用IFN-γ对B16小鼠进行基因治疗,然后停止一段时间(7days),观察残余瘤组织中MMP-2、MMP-9的变化及借此评价治疗的效果。方法:将一定剂量的B16癌细胞接种于C57BL/6小鼠右后腿肌肉内,建立小鼠肿瘤模型;采用可溶性PD-1(sPD-1)和4-1BBL,IFN-γ真核表达质粒于体内转染进行基因治疗;RT-PCR检测肿瘤微环境中4-1BBL、sPD-1、IFN-γ基因的表达;称取治疗后的瘤重及停止免疫治疗观察残余瘤组织中MMP-2、MMP-9的变化; RT-PCR检测肿瘤免疫基因治疗后残余瘤组织中IFN-γ的表达;观察体外IFN-γ对残余瘤细胞中MMP-2、MMP-9表达的影响。结果:联合转染4-1BBL/ sPD-1和IFN-γ基因治疗后,接种一定剂量的B16肿瘤细胞的小鼠肿瘤生长明显受到了抑制。在治疗3周后停止治疗,残余瘤组织中MMP-2, MMP-9于治疗结束时表达下降,于治疗结束一周后表达又明显上升,IFN-γ于治疗结束时表达上升,于治疗结束一周后表达下降。结论:采用4-1BBL协同sPD-1及IFN-γ进行的肿瘤免疫基因治疗虽取得了明显成效,但在治疗过程中若停止免疫治疗会导致肿瘤侵袭性的增加,这提示延长基因免疫治疗时间对于肿瘤疾病获得稳定的疗效是至关重要的。