人参是一种药用价值很高的中药材,在我国的传统中医诊疗应用方面源远流长,最早作为上品药材被记录于《神农本草经》,可以“轻身益气、延年不老”。但由于人参药材及饮片需求量大,中药材种植乱象丛生,中药材饮片市场质量没有严格保障,在加工过程中易掺杂、施假,很难辨别。国家急需对中药材市场进行整改和规范,2017年国家切实推进医疗机构中药饮片全过程质量管理,建立优质中药品种的质量标准体系和认证体系。现代药理学研究表明其对衰老过程中的神经系统有一定的调节作用,可加强大脑神经突触传递,还可降低大脑兴奋过程的疲惫性,易化学习记忆的获得、巩固和再现,具益智功效。因此,本研究筛选出人参皂苷中对衰老小鼠中脑源性神经营养因子具有正向调节作用的人参皂苷Rb1,对其作用机制进行研究。目的:本研究对人参药材和饮片的质量标准进行提升,依托成分-药效关联性对人参皂苷调节脑源性神经营养因子的作用机制进行研究。方法:1.人参药材及饮片质量标准的提升本研究通过对气相色谱法、气质联用法、液-质联用法对重金属及有害元素、真菌毒素、微生物的范围进行限定,保证药材和饮片的安全性;建立人参药材及饮片的指纹图谱方法,可以更加准确的鉴定市场上流通的各种伪品;建立七种人参皂苷“一标多测”法,对人参进行含量测定,保障药材及饮片生成过程的质量和临床疗效。2.人参皂苷对脑源性神经营养因子的调节作用本研究通过对野生型及基因敲除型小鼠行为学观察、病理形态检测及酶联免疫吸附试验考察人参皂苷对脑源性神经营养因子是否具有调节作用。3.人参皂苷Rb1调节脑源性神经营养因子作用机制的研究本研究通过CCK-8法确定D-半乳糖苷酶致SH-SY5Y细胞衰老模型的作用浓度、考察人参皂苷Rb1对SH-SY5Y细胞活力的影响,确定给药浓度;通过行为学观察、病理形态学检测、蛋白质印记法及聚合酶链式反应等方法对人参皂苷Rb1调节脑源性神经营养因子的机制进行研究。结果:1.根据种植基地中使用的农药种类,增加农药残留检测项目;着重对真菌毒素及微生物的范围进行限定;增加浸出物中浸膏率的范围限定;增加了指纹图谱项目;增加“一标多测”法对人参药材和饮片的质量标准进行提升。2.通过对野生型及基因敲除型小鼠行为学观察、病理形态检测及酶联免疫吸附试验的考察,确定人参总皂苷中大量存在的人参皂苷Rb1对BDNF具有调节作用。3.人参皂苷Rb1通过cAMP/PKA/CREB通路对脑源性神经营养因子进行调节,人参皂苷Rb1通过调节CREB的磷酸化,对BDNF基因的mRNA转录产生影响。结论:1.提升人参药材、人参饮片质量标准;2.确定人参总皂苷中人参皂苷Rb1对脑源性神经营养因子具有主要调节作用;3.人参皂苷Rb1激活cAMP/PKA/CREB通路,影响BDNF的mRNA的表达。