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生物大分子不仅是自然界中生命体的重要组成部分,而且还是重要的信息分子,在生命科学、化学、医学等学科研究中都具有举足轻重的地位。常见的生物大分子包括蛋白质、核酸以及生物多糖三种。本论文以生物大分子为主要研究对象,以滴汞电极为工作电极,采用线扫极谱法建立了三种生物大分子的电化学分析新方法。在选定的电位范围内,由于生物大分子本身没有电化学信号,故采用电活性有机染料小分子为电化学探针,在一定条件下,染料分子在滴汞电极上可以发生还原反应,出现良好的线性扫描极谱波,加入生物大分子后,它们之间发生相互作用导致电化学信号发生变化,从而可以对生物大分子进行间接研究。本论文主要包括以下三个方面的内容:
1.有机染料茜素红S、偶氮胂Ⅰ、偶氮胂Ⅲ与蛋白质相互作用的研究。
以茜素红S、偶氮胂Ⅰ和偶氮胂Ⅲ为电化学探针,利用加入蛋白质前后峰电流的降低值与蛋白质浓度成正比的原理,建立了测定蛋白质的新方法。优化了结合反应的条件,在最佳条件下建立了测定蛋白质的工作曲线并成功应用于蛋白质模拟样品的测定。讨论了染料-蛋白质反应体系在滴汞电极上的电化学行为,求解了反应体系的结合比和结合常数。
2.有机染料吖啶橙、藏红T、维多利亚蓝B与核酸相互作用的研究。
研究了吖啶橙、藏红T和维多利亚蓝B与核酸的相互作用,优化了结合反应条件,在最佳条件下测定了核酸工作曲线并将该方法应用于模拟样品的测定,结果令人满意。对反应体系在滴汞电极上的电化学行为进行了讨论,计算了相关电化学参数并求解了体系的结合比和结合常数。
3.有机染料吡啰红B、甲苯胺蓝与生物多糖硫酸软骨素相互作用的研究。
考察了吡啰红B和甲苯胺蓝与生物多糖硫酸软骨素的相互作用,优化了结合反应的条件,在最佳条件下,峰电流的降低值与硫酸软骨素的浓度成正比,将该方法应用于模拟样品的测定,结果令人满意。利用电化学数据求解了体系的结合比和结合常数。