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第一章:简要概述了单宁的研究现状及发展趋势,着重分析和总结单宁与蛋白作用的理论及单宁与金属离子的作用机制,以及模型金属离子结合蛋白和Tb3+离子探针在研究蛋白质的结构、功能以及相互作用机理的重要作用。提出了本文立题的意义及研究内容。 第二章:本文采用还原C法,在不同温度下,对羊毛纤维进行粗提。结果表明:温度为72℃,提取角蛋白,DEAE-纤维素32离子交换层析法纯化粗提的羊毛角蛋白液,并用SDS-PAGE法对羊毛角蛋白进行检测,能得到角蛋白分子量约为31kDa. 第三章:本文采用荧光光谱法,在不同的温度和pH下,研究了三种单宁(TA、EA和GA)与Keratin的相互作用,探索了三者与Keratin作用的基本实验条件。在不同温度或pH条件下,TA、EA和GA对Keratin的荧光均具有猝灭作用,其猝灭机理为静态猝灭过程。并计算求得了Keratin分别与TA、EA和GA的表观结合常数(KA)和结合位点数(n)。热力学参数计算可知:△G<0,△H>0,△S>0,表明三种不同的单宁与角蛋白的作用力主要是疏水作用。进一步研究了Keratin与疏水荧光探针TNS的作用,其结合常数(KA)为3.26×105mol-1·L,并具有1个TNS结合位点。通过共振光散射研究表明:TA与Keratin作用后聚集形成了复合物,这些复合物可通过离心除去;而EA或GA与Keratin作用后,共振光散射强度基本没有发生变化,表明EA或GA与Keratin形成可溶性复合物。三种单宁与Keratin的共振光散射现象表明:单宁不同,其与Keratin发生聚集的行为也不同。 第四章:初步进行了多酚染料羊毛染色试验,结果表明多酚染料可以上染羊毛,其染色工艺有待深入研究。 第五章:在室温下,pH为7.40、0.1 mol·L-1 Tris缓冲液中,采用荧光光谱法研究了不同比例的Tb3+-TA配合物与Keratin的作用。结果表明:Tb3+-TA配合物对Keratin的荧光均具有猝灭作用,且都是形成复合物引起的静态猝灭过程。TA-Tb3+配合物均可与该蛋白结合形成1∶1配合物,结合稳定。经过热力学参数的计算表明:疏水作用可能是主要的作用力,这与目前认为的药物与蛋白结合的主要作用力类型相一致。