柠条是豆科锦鸡儿属灌木,具有广泛的适应性和抗逆性,是寒旱荒漠区防风固沙、拦泥蓄水的主要栽培树种,在环保、饲用、药用和食用方面都具有重要的生态价值和经济价值。随着对柠条基因功能的研究越来越多,尚未见到柠条高效稳定遗传转化技术的研究报道。同为豆科植物的大豆,其毛状根遗传转化技术已相对成熟。本研究根据大豆毛状根遗传转化的特点和技术,以中间锦鸡儿为研究植物材料,对产生的毛状根进行β-葡聚糖苷酶（GUS）活性染色（显蓝色判定为阳性）,通过对发根农杆菌的不同菌株、菌液浓度、添加乙酰丁香酮的浓度、对幼苗植株的注射位置、被注射的次数及注射后黑暗处理时间等几个主要影响因素,进行单因素分析和多因素正交试验,初步建立了中间锦鸡儿毛状根遗传转化体系,并进行了优化,优化后的结果如下:1.发根农杆菌K599为较好菌株,其毛状根诱导率可达到30%、毛状根转化率可达到24%。最佳菌液浓度OD600=0.9,其毛状根诱导率可达到39%、毛状根转化率可达到33.7%。2.最佳注射位置为下胚轴子叶节,其毛状根诱导率可达到27.7%、毛状根转化率可达到22.2%。最佳注射次数为2次,其毛状根诱导率可达到26.9%、毛状根转化率可达到23.1%。注射后无需黑暗处理,毛状根诱导率可达到40%、毛状根转化率可达到32%。最佳乙酰丁香酮浓度为50 mmol/L,其毛状根诱导率可达到26.8%、毛状根转化率可达到23.2%。3.针对菌液浓度A(OD600=0.3、0.9、1.5),乙酰丁香酮浓度B（0、50、100mmol/L）,注射后黑暗处理时间C（0、48、120h）进行L9（34）正交实验优化,通过对正交实验中各因素水平所对应指标结果平均值的大小进行分析,最终获得最佳的组合为A2B2C1,即菌液浓度为OD600=0.9、乙酰丁香酮浓度为50 mmol/L、无黑暗处理。本研究为利用中间锦鸡儿毛状根系统进行后续的基因功能鉴定奠定了基础,并为建立柠条高效稳定的遗传转化体系提供了一种可行的途径。