论文部分内容阅读
目的:研究抗血管生成因子可溶性Fms样酪氨酸激酶-1(soluble fms-like tyrosine kinase-1,sFlt-1)和血管生成因子胎盘生长因子(placental growth factor,PlGF)在子痫前期发病中的作用并探讨其中所包含的血管作用靶标和信号通路。方法:在正常孕鼠孕第14天,不做处理的为Preg组;将装有sFlt-1(10微克/千克体重/天)的渗透性微型真空泵埋入孕鼠颈静脉内,得到Preg+sFlt-1组;将孕鼠在麻醉下经手术减少子宫胎盘灌注压(reduceduteroplacental perfusionpressure,RUPP),得到RUPP组;在RUPP组的基础上,将装有PlGF(20微克/千克体重/天)的微型泵埋入孕鼠颈静脉内,得到RUPP+PlGF组。在怀孕第19天分别测量并记录各组的血压值;取新鲜血液离心得到血浆;然后将大鼠安乐死,将子宫、胎鼠和胎盘取出,称重并分别记录;将解剖干净主动脉、颈动脉、肠系膜上动脉和肾动脉进行等长收缩和舒张实验,并测试其在内皮一氧化氮-鸟苷酸环化酶抑制剂或去除内皮细胞的情况下收缩和舒张反应的变化。蛋白印迹实验检测各组主动脉中内皮源性一氧化氮合酶(endothelialnitricoxide synthase,eNOS)和磷酸化eNOS的含量。检测各组主动脉和肠系膜上动脉中硝酸盐/亚硝酸盐含量。检测各组血浆中sFlt-1和PlGF含量,并计算其比值。结果:在怀孕第19天,Preg+sFlt-1和RUPP组的血压要高于Preg组,RUPP+PlGF组血压低于RUPP组。血浆sFlt-1/PlGF比值在Preg+sFlt-1和RUPP组升高,在RUPP+PlGF组降低。在分离得到的内皮完整的主动脉、颈动脉、肠系膜动脉和肾动脉中,Phe和高浓度KC1导致的收缩反应,Preg+sFlt-1和RUPP组高于Preg组,RUPP+PlGF组低于RUPP组。不同实验组的血管对Phe和KC1反应的差异没有显著的差异,当血管用一氧化氮合酶抑制剂L-NAME或者鸟苷酸环酶抑制剂ODQ或者去内皮,揭示了内皮的NO-cGMP通路。在用Phe预先收缩的血管中,乙酰胆碱(ACh)介导的舒张反应Preg+sFlt-1和RUPP组低于Preg组,RUPP+PlGF组高于RUPP组,并且当血管用L-NAME或者ODQ预处理或者去除内皮后,舒张反应会被阻断。蛋白质印迹实验揭示主动脉中eNOS和活性磷酸化eNOS的含量Preg+sFlt-1和RUPP组低于Preg组,RUPP+PlGF组高于RUPP组。乙酰胆碱介导的血管磷酸盐/亚磷酸盐含量Preg+sFlt-1和RUPP组低于Preg组,RUPP+PlGF组高于RUPP组。不同模型组血管对外源性NO供体硝普钠的舒张反应没有明显差异。结论:在抗血管生成因子sFlt-1和血管生成因子PlGF形成的稳态中,当sFlt-1含量升高时,血管内皮NO-cGMP通路介导的舒张反应降低、血管收缩增加、血压升高。使用PlGF可增强妊高征大鼠的内皮NO-cGMP通路介导的血管舒张、降低血管收缩和血压,重建血管生成和抗血管生成平衡,这将是妊娠期子痫前期治疗的一个新的手段。